समस्या विश्लेषण मार्गदर्शक

विषाणूजन्य DNA/RNA काढताना येणाऱ्या समस्यांचे विश्लेषण खाली दिले आहे, तुमच्या प्रयोगांना मदत होईल अशी आशा आहे.याव्यतिरिक्त, ऑपरेशन सूचना आणि समस्या विश्लेषणाव्यतिरिक्त इतर प्रायोगिक किंवा तांत्रिक समस्यांसाठी, आम्ही तुम्हाला मदत करण्यासाठी तांत्रिक समर्थन समर्पित केले आहे.आपल्याला काही गरज असल्यास, कृपया आमच्याशी संपर्क साधा: 028-83360257 किंवा ई-मेल:

Tech@foregene.com.

न्यूक्लिक अॅसिड काढणे किंवा कमी न्यूक्लिक अॅसिड उत्पन्न नाही

पुनर्प्राप्ती कार्यक्षमतेवर परिणाम करणारे सहसा अनेक घटक असतात, जसे की: नमुना न्यूक्लिक अॅसिड सामग्री, ऑपरेशन पद्धत, उत्सर्जन मात्रा इ.

सामान्य कारणांचे विश्लेषण:

1. प्रक्रियेदरम्यान बर्फाचे स्नान किंवा कमी तापमान (4°C) सेंट्रीफ्यूगेशन केले गेले.

सूचना: संपूर्ण प्रक्रियेदरम्यान खोलीच्या तपमानावर (15-25 डिग्री सेल्सिअस) चालवा, बर्फ आंघोळ करू नका आणि कमी तापमानात सेंट्रीफ्यूगेशन करू नका.

2. नमुना अयोग्यरित्या संग्रहित केला गेला होता किंवा नमुना बराच काळ साठवला गेला होता.

शिफारस: -80 डिग्री सेल्सिअस तापमानात नमुने साठवा आणि वारंवार गोठणे आणि वितळणे टाळा;न्यूक्लिक अॅसिड काढण्यासाठी नव्याने गोळा केलेले नमुने वापरण्याचा प्रयत्न करा.

3. अपुरा नमुना लिसिस.

शिफारस: कृपया खात्री करा की नमुना आणि लिसिस वर्किंग सोल्यूशन पूर्णपणे मिसळले गेले आहे आणि खोलीच्या तपमानावर (15-25°C) 10 मिनिटे उबवलेले आहे.

4. एल्युएंटची चुकीची जोड.

सूचना: RNase-Free ddH2O शुद्धीकरण स्तंभाच्या झिल्लीच्या मध्यभागी ड्रॉपवाइज जोडले असल्याची खात्री करा आणि ते शुद्धीकरण स्तंभाच्या अंगठीवर टाकू नका.

5. बफर RW2 मध्ये परिपूर्ण इथेनॉलची योग्य मात्रा जोडली गेली नाही.

सूचना: कृपया सूचनांचे अनुसरण करा, बफर RW2 मध्ये परिपूर्ण इथेनॉलचे योग्य प्रमाण जोडा आणि किट वापरण्यापूर्वी चांगले मिसळा.

6. अयोग्य नमुना खंड.

सूचना: प्रत्येक 500µl बफर DRL साठी 200µl नमुन्याची प्रक्रिया केली जाते.अत्याधिक नमुना प्रक्रियेमुळे न्यूक्लिक अॅसिड निष्कर्षण उत्पन्न कमी होईल.

7. अयोग्य इल्युशन व्हॉल्यूम किंवा अपूर्ण इल्युशन.

शिफारस: शुध्दीकरण स्तंभाची एल्युएंट व्हॉल्यूम 30-50μl आहे;जर उत्सर्जनाचा परिणाम समाधानकारक नसेल, तर खोलीच्या तपमानावर प्रीहीटेड RNase-फ्री ddH2O, जसे की 5-10 मिनिटे जोडल्यानंतर वेळ वाढवण्याची शिफारस केली जाते.

8. बफर RW2 सह धुतल्यानंतर इथेनॉल स्तंभावर राहते.

सूचना: जर इथेनॉल बफर RW2 सह सेंट्रीफ्यूगेशननंतर 2 मिनिटे शिल्लक राहिले तर, अवशिष्ट इथेनॉल पूर्णपणे काढून टाकण्यासाठी स्तंभ सेंट्रीफ्यूगेशननंतर 5 मिनिटे खोलीच्या तपमानावर ठेवता येईल.

शुद्ध केलेले न्यूक्लिक अॅसिड खराब होते

शुद्ध केलेल्या न्यूक्लिक अॅसिडची गुणवत्ता नमुन्याचे जतन, RNase दूषित होणे, ऑपरेशन आणि इतर घटकांशी संबंधित आहे.सामान्य कारणांचे विश्लेषण:

1. गोळा केलेले नमुने वेळेत साठवले गेले नाहीत.

सूचना: जर नमुना संकलनानंतर वेळेत वापरला गेला नाही, तर कृपया ताबडतोब कमी तापमानात -80°C वर साठवा.RNA काढण्यासाठी, ताजे गोळा केलेले नमुने वापरण्याचा प्रयत्न करा.

2. नमुने गोळा करा आणि गोठवा आणि वारंवार वितळवा.

सूचना: नमुने गोळा करताना आणि साठवताना गोठणे आणि वितळणे (एकापेक्षा जास्त वेळा नाही) टाळा, अन्यथा न्यूक्लिक अॅसिडचे उत्पादन कमी होईल.

3. ऑपरेशन रूममध्ये RNase लावले जाते किंवा डिस्पोजेबल हातमोजे, मुखवटे इत्यादी परिधान केले जात नाहीत.

शिफारस: RNA काढण्याचे प्रयोग वेगळ्या RNA ऑपरेशन रूममध्ये उत्तम प्रकारे केले जातात आणि प्रयोगापूर्वी प्रयोगशाळेतील टेबल स्वच्छ केले पाहिजे.

RNase च्या प्रवेशामुळे होणारे RNA ऱ्हास टाळण्यासाठी प्रयोगादरम्यान डिस्पोजेबल हातमोजे आणि मास्क घाला.

4. वापर दरम्यान अभिकर्मक RNase सह दूषित होते.

शिफारस: संबंधित प्रयोगांसाठी नवीन व्हायरल डीएनए/आरएनए आयसोलेशन किटने बदला.

5. आरएनए मॅनिपुलेशनसाठी वापरल्या जाणार्‍या सेंट्रीफ्यूज ट्यूब आणि विंदुक टिपा RNase द्वारे दूषित आहेत.

सूचना: आरएनए काढण्यासाठी वापरल्या जाणार्‍या सेंट्रीफ्यूज ट्यूब, विंदुक टिपा, विंदुक इ. सर्व RNase-मुक्त असल्याची खात्री करा.

शुद्ध केलेले न्यूक्लिक अॅसिड डाउनस्ट्रीम प्रयोगांवर परिणाम करते

शुद्धीकरण स्तंभाद्वारे शुद्ध केलेले डीएनए आणि आरएनए, जर मीठ आयन आणि प्रथिनांचे प्रमाण खूप जास्त असेल तर ते डाउनस्ट्रीम प्रयोगांवर परिणाम करेल, जसे की: पीसीआर प्रवर्धन, रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन इ.

1. एल्युटेड डीएनए आणि आरएनएमध्ये अवशिष्ट मीठ आयन असतात.

सूचना: बफर RW2 मध्ये परिपूर्ण इथेनॉलचे योग्य प्रमाण जोडले आहे याची खात्री करा आणि ऑपरेटिंग निर्देशांमध्ये निर्दिष्ट केलेल्या सेंट्रीफ्यूगेशन गतीने शुद्धीकरण स्तंभ दोनदा धुवा;मीठ आयन दूषित होणे कमी करण्यासाठी सेंट्रीफ्यूगेशन करा.

2. एल्युटेड डीएनए आणि आरएनएमध्ये इथेनॉल अवशेष असतात.

सूचना: बफर RW2 सह वॉशिंगची पुष्टी केल्यानंतर, ऑपरेटिंग निर्देशांमध्ये सेंट्रीफ्यूगेशन वेगाने रिक्त ट्यूब सेंट्रीफ्यूगेशन करा;इथेनॉलचे अवशेष अजूनही असल्यास, तुम्ही रिकाम्या नळीला सेंट्रीफ्यूज करू शकता आणि नंतर इथेनॉलचे अवशेष जास्तीत जास्त प्रमाणात काढून टाकण्यासाठी खोलीच्या तपमानावर 5 मिनिटे ठेवू शकता.

सूचना पुस्तिका:

व्हायरल डीएनए आणि आरएनए अलगाव किट सूचना पुस्तिका