• फेसबुक
  • लिंक्डइन
  • YouTube
बॅनर

मूलभूत आण्विक जीवशास्त्र संज्ञांचे स्पष्टीकरण

आण्विक जीवशास्त्र किट्स

1. cDNA आणि cccDNA: cDNA हे mRNA पासून रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेसद्वारे संश्लेषित केलेले दुहेरी-असरलेले DNA आहे;cccDNA हा क्रोमोसोमपासून मुक्त असलेला प्लाझमिड डबल-स्ट्रँडेड बंद वर्तुळाकार DNA आहे.
2. स्टँडर्ड फोल्डिंग युनिट: प्रोटीन दुय्यम संरचना युनिट α-हेलिक्स आणि β-शीट विविध कनेक्टिंग पॉलीपेप्टाइड्सद्वारे विशेष भौमितीय मांडणीसह स्ट्रक्चरल ब्लॉक्स बनवू शकतात.या प्रकारच्या निर्धारित फोल्डिंगला सामान्यतः सुपर दुय्यम संरचना म्हणतात.जवळजवळ सर्व तृतीयक संरचनांचे या फोल्डिंग प्रकारांद्वारे वर्णन केले जाऊ शकते आणि त्यांच्या एकत्रित प्रकारांद्वारे देखील, म्हणून त्यांना मानक फोल्डिंग युनिट्स देखील म्हणतात.
3. सीएपी: चक्रीय एडेनोसाइन मोनोफॉस्फेट (सीएएमपी) रिसेप्टर प्रोटीन सीआरपी (सीएएमपी रिसेप्टर प्रोटीन), सीएएमपी आणि सीआरपीच्या संयोगानंतर तयार झालेल्या कॉम्प्लेक्सला सक्रिय प्रोटीन सीएपी (सीएएमपी सक्रिय प्रोटीन) म्हणतात.
4. पॅलिंड्रोमिक सीक्वेन्स: डीएनए तुकड्याच्या सेगमेंटचा उलटा पूरक क्रम, अनेकदा प्रतिबंधित एन्झाइम साइट.
5. micRNA: पूरक हस्तक्षेप करणारे RNA किंवा antisense RNA, जे mRNA अनुक्रमाला पूरक आहे आणि mRNA चे भाषांतर रोखू शकते.
6. रिबोझाइम: उत्प्रेरक क्रियाकलाप असलेले आरएनए, जे आरएनएच्या स्प्लिसिंग प्रक्रियेमध्ये स्वयं उत्प्रेरक भूमिका बजावते.
7. आकृतिबंध: प्रथिने रेणूंच्या अवकाशीय संरचनेत समान त्रिमितीय आकार आणि टोपोलॉजी असलेले काही स्थानिक प्रदेश आहेत.
8. सिग्नल पेप्टाइड: प्रोटीन संश्लेषणादरम्यान एन-टर्मिनसवर 15-36 अमीनो ऍसिडचे अवशेष असलेले पेप्टाइड, जे प्रथिनांच्या ट्रान्समेम्ब्रेनला मार्गदर्शन करते.
9. अॅटेन्युएटर: ऑपरेटर क्षेत्र आणि लिप्यंतरण समाप्त करणारे स्ट्रक्चरल जनुक यांच्यातील न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम.
10. मॅजिक स्पॉट: जेव्हा बॅक्टेरिया वाढतात आणि अमीनो ऍसिडची पूर्ण कमतरता आढळतात, तेव्हा जीवाणू सर्व जनुकांची अभिव्यक्ती थांबवण्यासाठी आपत्कालीन प्रतिक्रिया निर्माण करतात.हा आणीबाणीचा प्रतिसाद निर्माण करणारे सिग्नल ग्वानोसिन टेट्राफॉस्फेट (ppGpp) आणि ग्वानोसिन पेंटाफॉस्फेट (pppGpp) आहेत.पीपीजीपीपी आणि पीपीपीजीपीपीची भूमिका केवळ एक किंवा काही ऑपेरॉनची नाही, परंतु त्यांच्यापैकी मोठ्या संख्येने प्रभावित करते, म्हणून त्यांना सुपर-रेग्युलेटर किंवा मॅजिक स्पॉट्स म्हणतात.
11. अपस्ट्रीम प्रवर्तक घटक: प्रवर्तकाच्या क्रियाकलापांमध्ये नियामक भूमिका बजावणाऱ्या DNA क्रमाचा संदर्भ देते, जसे की -10 प्रदेशात TATA, -35 प्रदेशातील TGACA, वर्धक आणि attenuators.
12. डीएनए प्रोब: ज्ञात अनुक्रमासह डीएनएचा लेबल केलेला विभाग, ज्याचा वापर अज्ञात अनुक्रम आणि स्क्रीन लक्ष्य जीन्स शोधण्यासाठी मोठ्या प्रमाणावर केला जातो.
13. SD अनुक्रम: हा राइबोसोम आणि mRNA चा बंधनकारक क्रम आहे, जो अनुवादाचे नियमन करतो.
14. मोनोक्लोनल ऍन्टीबॉडी: एक ऍन्टीबॉडी जी फक्त एकाच ऍन्टीजेनिक निर्धारकाच्या विरूद्ध कार्य करते.
15. कॉस्मिड: हे कृत्रिमरित्या तयार केलेले एक्सोजेनस डीएनए व्हेक्टर आहे जे फेजच्या दोन्ही टोकांना COS क्षेत्रे राखून ठेवते आणि प्लाझमिडशी जोडलेले असते.
16. निळा-पांढरा स्पॉट स्क्रीनिंग: LacZ जनुक (एंकोडिंग β-galactosidase), एन्झाइम क्रोमोजेनिक सब्सट्रेट X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) चे विघटन करून निळा तयार करू शकतो, त्यामुळे ताण निळा होतो.जेव्हा एक्सोजेनस डीएनए घातला जातो, तेव्हा LacZ जनुक व्यक्त करता येत नाही, आणि ताण पांढरा असतो, ज्यामुळे रीकॉम्बिनंट बॅक्टेरिया तपासता येतो.याला ब्लू-व्हाइट स्क्रीनिंग म्हणतात.
17. सीआयएस-अभिनय घटक: डीएनए मधील बेसचा एक विशिष्ट क्रम जो जनुक अभिव्यक्तीचे नियमन करतो.
18. Klenow एन्झाइम: DNA पॉलिमरेझ I चा मोठा तुकडा, 5' 3' exonuclease क्रियाकलाप DNA पॉलिमरेझ I होलोएन्झाइममधून काढून टाकला जातो.
19. अँकर केलेले पीसीआर: एका टोकाला ज्ञात अनुक्रमाने स्वारस्य असलेल्या डीएनएला वाढवण्यासाठी वापरले जाते.अज्ञात क्रमाच्या एका टोकाला पॉली-डीजी शेपटी जोडली गेली आणि नंतर पॉली-डीसी आणि ज्ञात अनुक्रम PCR प्रवर्धनासाठी प्राइमर्स म्हणून वापरले गेले.
20. फ्यूजन प्रोटीन: युकेरियोटिक प्रथिनांचे जनुक एक्सोजेनस जनुकाशी जोडलेले असते आणि मूळ जनुक प्रथिने आणि एक्सोजेनस प्रोटीनच्या भाषांतराने बनलेले प्रोटीन एकाच वेळी व्यक्त केले जाते.

इतर आण्विक जीवशास्त्र संज्ञा

1. DNA चा भौतिक नकाशा हा DNA रेणूचे (प्रतिबंध एंडोन्युक्लीज-डायस्टेड) ​​तुकड्यांचा क्रम आहे.
2. RNase चे क्लीवेज दोन प्रकारात विभागलेले आहे (ऑटोकॅटॅलिसिस) आणि (हेटरोकॅटलिसिस).
3. प्रोकेरियोट्समध्ये तीन दीक्षा घटक आहेत (IF-1), (IF-2) आणि (IF-3).
4. ट्रान्समेम्ब्रेन प्रथिनांना मार्गदर्शनाची आवश्यकता असते (सिग्नल पेप्टाइड्स), आणि प्रथिने चेपेरोन्सची भूमिका असते (पेप्टाइड साखळीला प्रथिनांच्या मूळ स्वरूपामध्ये दुमडण्यास मदत करते).
5. प्रवर्तकांमधील घटक साधारणपणे दोन प्रकारांमध्ये विभागले जाऊ शकतात: (कोर प्रवर्तक घटक) आणि (अपस्ट्रीम प्रवर्तक घटक).
6. आण्विक जीवशास्त्राच्या संशोधन सामग्रीमध्ये प्रामुख्याने तीन भाग समाविष्ट आहेत: (स्ट्रक्चरल आण्विक जीवशास्त्र), (जीन अभिव्यक्ती आणि नियमन), आणि (डीएनए पुनर्संयोजन तंत्रज्ञान).
7. डीएनए ही अनुवांशिक सामग्री आहे हे दाखवणारे दोन प्रमुख प्रयोग आहेत (उंदरांचा न्यूमोकोकस संसर्ग) आणि (एस्चेरिचिया कोलायचा टी2 फेज संसर्ग).संभाव्य).
8. hnRNA आणि mRNA मधील दोन मुख्य फरक आहेत: (hnRNA mRNA मध्ये रूपांतरित होण्याच्या प्रक्रियेत कापला जातो), (mRNA चा 5' टोक m7pGppp टोपीने जोडला जातो आणि mRNA ऍसिड (पॉलीए) शेपटीच्या 3' टोकाला अतिरिक्त पॉलीएडेनिलेशन असते).
9. प्रथिनांच्या मल्टी-सब्युनिट स्वरूपाचे फायदे आहेत (सब्युनिट ही डीएनए वापरासाठी एक आर्थिक पद्धत आहे), (प्रथिने संश्लेषणातील यादृच्छिक त्रुटींचा प्रथिने क्रियाकलापांवर प्रभाव कमी करू शकतो), (क्रियाकलाप अतिशय कार्यक्षमतेने आणि वेगाने उघडले आणि बंद केले जाऊ शकते).
10. प्रोटीन फोल्डिंग मेकॅनिझम फर्स्ट न्यूक्लिएशन सिद्धांताच्या मुख्य सामग्रीमध्ये (न्यूक्लिएशन), (स्ट्रक्चरल समृद्धी), (अंतिम पुनर्रचना) समाविष्ट आहे.
11. गॅलेक्टोजचा जीवाणूंवर दुहेरी प्रभाव असतो;एकीकडे (ते सेल वाढीसाठी कार्बन स्त्रोत म्हणून वापरले जाऊ शकते);दुसरीकडे (तो सेल भिंतीचा एक घटक देखील आहे).म्हणून, पार्श्वभूमी स्तरावर कायमस्वरूपी संश्लेषणासाठी सीएएमपी-सीआरपी-स्वतंत्र प्रवर्तक S2 आवश्यक आहे;त्याच वेळी, उच्च-स्तरीय संश्लेषणाचे नियमन करण्यासाठी CAMP-CRP-आश्रित प्रवर्तक S1 आवश्यक आहे.ट्रान्सक्रिप्शन (S2) पासून G सह आणि (S1) पासून G शिवाय सुरू होते.
12. रीकॉम्बिनंट डीएनए तंत्रज्ञानाला (जीन क्लोनिंग) किंवा (आण्विक क्लोनिंग) असेही म्हणतात.अंतिम ध्येय आहे (एका जीवातील अनुवांशिक माहिती डीएनए दुसऱ्या जीवात हस्तांतरित करणे).सामान्यतः डीएनए पुनर्संयोजन प्रयोगामध्ये खालील पायऱ्यांचा समावेश होतो: (१) दात्याच्या जीवाचे लक्ष्य जनुक (किंवा एक्सोजेनस जीन) काढा आणि नवीन रीकॉम्बिनंट डीएनए रेणू तयार करण्यासाठी एनजाइमॅटिकरीत्या दुसर्या डीएनए रेणूशी (क्लोनिंग वेक्टर) कनेक्ट करा.② रिकॉम्बिनंट डीएनए रेणू प्राप्तकर्त्याच्या सेलमध्ये हस्तांतरित केला जातो आणि प्राप्तकर्त्याच्या सेलमध्ये त्याची प्रतिकृती तयार केली जाते.या प्रक्रियेला परिवर्तन म्हणतात.③ स्क्रीन आणि त्या प्राप्तकर्त्या पेशी ओळखा ज्यांनी रीकॉम्बीनंट डीएनए शोषून घेतला आहे.④परकीय सहाय्य जनुक व्यक्त झाले आहे की नाही हे शोधण्यासाठी मोठ्या प्रमाणात रीकॉम्बिनंट डीएनए असलेल्या पेशींची लागवड करा.
13. प्लाझमिड प्रतिकृतीचे दोन प्रकार आहेत: यजमान सेल प्रोटीन संश्लेषणाद्वारे काटेकोरपणे नियंत्रित केलेल्यांना (घट्ट प्लाझमिड) म्हणतात आणि जे होस्ट सेल प्रोटीन संश्लेषणाद्वारे काटेकोरपणे नियंत्रित होत नाहीत त्यांना (रिलॅक्स्ड प्लाझमिड) म्हणतात.
14. पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणालीमध्ये खालील अटी असाव्यात: अ.डीएनए प्राइमर्स (सुमारे 20 बेस) विभक्त करण्याच्या लक्ष्य जनुकाच्या दोन स्ट्रँडच्या प्रत्येक टोकाला पूरक अनुक्रमांसह.bथर्मल स्थिरतेसह एंजाइम जसे की: TagDNA पॉलिमरेझ.c, dNTPd, टेम्प्लेट म्हणून स्वारस्य DNA क्रम
15. पीसीआरच्या मूलभूत प्रतिक्रिया प्रक्रियेमध्ये तीन टप्पे समाविष्ट आहेत: (विकृतीकरण), (अॅनिलिंग), आणि (विस्तार).
16. ट्रान्सजेनिक प्राण्यांच्या मूलभूत प्रक्रियेमध्ये सामान्यतः खालील गोष्टींचा समावेश होतो: ① फलित अंडी किंवा भ्रूण स्टेम सेलच्या केंद्रकामध्ये क्लोन केलेल्या परदेशी जनुकाचा परिचय;②इनोक्यूलेटेड फलित अंडी किंवा भ्रूण स्टेम सेलचे मादी गर्भाशयात प्रत्यारोपण;③पूर्ण भ्रूण विकास आणि वाढ परदेशी जनुकांसह संततीसाठी;④ नवीन एकसंध रेषा प्रजननासाठी प्रजनन स्टॉक म्हणून परदेशी प्रथिने तयार करू शकणारे प्राणी वापरा.
17. हायब्रिडोमा सेल लाइन्स (मायलोमा) पेशींसह (प्लीहा बी) पेशी संकरित करून तयार केल्या जातात आणि (प्लीहा पेशी) हायपोक्सॅन्थिनचा वापर करू शकतात आणि (हाडांच्या पेशी) पेशी विभाजन कार्ये प्रदान करतात, त्या HAT माध्यमात वाढू शकतात.वाढणे
18. संशोधनाच्या सखोलतेने, प्रतिपिंडांच्या पहिल्या पिढीला (पॉलीक्लोनल ऍन्टीबॉडीज), दुसरी पिढी (मोनोक्लोनल ऍन्टीबॉडीज) आणि तिसरी पिढी (अनुवांशिक अभियांत्रिकी प्रतिपिंडे) म्हणतात.
19. सध्या, कीटक विषाणूंचे अनुवांशिक अभियांत्रिकी प्रामुख्याने बॅक्युलोव्हायरसवर केंद्रित आहे, जे (एक्सोजेनस टॉक्सिन जीन) च्या परिचयातून प्रकट होते;(कीटकांच्या सामान्य जीवन चक्रात व्यत्यय आणणारी जीन्स);(व्हायरस जनुकांमध्ये बदल).
20. सस्तन प्राणी RNA पॉलिमरेझ II प्रवर्तकामध्ये TATA, GC आणि CAAT या सामान्य घटकांशी संबंधित ट्रान्स-अॅक्टिंग प्रोटीन घटक अनुक्रमे (TFIID), (SP-1) आणि (CTF/NF1) आहेत.
एकवीस.RNA पॉलिमरेज Ⅱ चे मूलभूत ट्रान्सक्रिप्शन घटक आहेत, TFⅡ-A, TFⅡ-B, TFII-D, TFⅡ-E, आणि त्यांचा बंधनकारक क्रम आहे: (D, A, B, E).ज्यामध्ये TFII-D चे कार्य आहे (TATA बॉक्सला बंधनकारक).
बावीस.DNA ला जोडणारे बहुतेक ट्रान्सक्रिप्शन घटक डायमरच्या स्वरूपात कार्य करतात.ट्रान्सक्रिप्शन घटकांचे कार्यात्मक डोमेन जे DNA ला बांधतात ते सामान्यतः खालील आहेत (हेलिक्स-टर्न-हेलिक्स), (झिंक फिंगर मोटिफ), (बेसिक-ल्यूसीन) जिपर मोटिफ).
तेवीस.रिस्ट्रिक्शन एंडोन्यूक्लीज क्लीव्हेज मोडचे तीन प्रकार आहेत: (5' चिकट टोके निर्माण करण्यासाठी सममिती अक्षाच्या 5' बाजूने कट करा), (3' चिकट टोके निर्माण करण्यासाठी सममिती अक्षाच्या 3' बाजूने कट करा (सममिती अक्षावर कट करा) सपाट टोके तयार करा.
चोवीस.प्लास्मिड डीएनएमध्ये तीन भिन्न कॉन्फिगरेशन आहेत: (SC कॉन्फिगरेशन), (oc कॉन्फिगरेशन), (L कॉन्फिगरेशन).इलेक्ट्रोफोरेसीसमधील पहिले (SC कॉन्फिगरेशन) आहे.
25. एक्सोजेनस जनुक अभिव्यक्ती प्रणाली, मुख्यत्वे (एस्चेरिचिया कोली), (यीस्ट), (कीटक) आणि (सस्तन प्राणी कोशिका टेबल).
26. ट्रान्सजेनिक प्राण्यांसाठी सामान्यतः वापरल्या जाणार्‍या पद्धती आहेत: (रेट्रोव्हायरल संसर्ग पद्धत), (डीएनए मायक्रोइंजेक्शन पद्धत), (भ्रूण स्टेम सेल पद्धत).

अनुप्रयोग आण्विक जीवशास्त्र

1. 5 पेक्षा जास्त RNA च्या कार्यांची नावे सांगा?
हस्तांतरण RNA tRNA हस्तांतरण अमिनो आम्ल राइबोसोम RNA rRNA रिबोसोम मेसेंजर RNA mRNA प्रथिने संश्लेषण टेम्पलेट बनवते विषम परमाणु RNA hnRNA परिपक्व mRNA लहान परमाणु RNA snRNA hnRNA स्प्लिसिंगमध्ये गुंतलेले लहान सायटोप्लाझमिक RNA-ScRNA प्लॅस्टिक रीएनएएसएलम-प्रोटीन-सिंथेसिस-आरएनए स्प्लिसिंग आकाराचे सिग्नल ओळखणे शरीराचे घटक अँटीसेन्स आरएनए anRNA/micRNA जनुक अभिव्यक्ती नियंत्रित करते रिबोझाइम आरएनए एन्झामॅटिकली सक्रिय आरएनए
2. प्रोकेरियोटिक आणि युकेरियोटिक प्रवर्तकांमध्ये मुख्य फरक काय आहे?
प्रोकेरियोटिक टीटीजीएसीए --- टाटाट------इनिशिएशन साइट-35 -10 युकेरियोटिक एन्हान्सर---जीसी ---सीएएटी----टाटा-5mGpp-इनिशिएशन साइट-110 -70 -25
3. नैसर्गिक प्लास्मिड्सच्या कृत्रिम बांधकामाचे मुख्य पैलू कोणते आहेत?
नैसर्गिक प्लास्मिड्समध्ये अनेकदा दोष असतात, त्यामुळे ते अनुवांशिक अभियांत्रिकीसाठी वाहक म्हणून वापरण्यासाठी योग्य नसतात आणि ते सुधारित आणि बांधले जाणे आवश्यक आहे: अ.योग्य निवड चिन्हक जीन्स जोडा, जसे की दोन किंवा अधिक, जे निवडीसाठी वापरण्यास सोपे आहेत, सामान्यतः प्रतिजैविक जीन्स.bपुनर्संयोजन सुलभ करण्यासाठी योग्य एंजाइम कटिंग साइट्स वाढवा किंवा कमी करा.cलांबी कमी करा, अनावश्यक तुकडे कापून टाका, आयात कार्यक्षमता सुधारा आणि लोडिंग क्षमता वाढवा.dप्रतिकृती, घट्ट ते सैल, कमी प्रतींपासून अधिक प्रतींमध्ये बदला.eअनुवांशिक अभियांत्रिकीच्या विशेष आवश्यकतांनुसार विशेष अनुवांशिक घटक जोडा
4. टिश्यू-विशिष्ट cDNA च्या विभेदक तपासणीसाठी पद्धतीचे उदाहरण द्या?
दोन पेशींची लोकसंख्या तयार केली जाते, लक्ष्य जनुक एका पेशीमध्ये व्यक्त किंवा जास्त व्यक्त केले जाते आणि लक्ष्य जनुक दुसर्‍या पेशीमध्ये व्यक्त किंवा कमी व्यक्त केले जात नाही आणि नंतर लक्ष्य जनुक संकरीकरण आणि तुलना करून शोधले जाते.उदाहरणार्थ, ट्यूमरच्या घटना आणि विकासादरम्यान, ट्यूमर पेशी सामान्य पेशींपेक्षा भिन्न अभिव्यक्ती पातळीसह mRNA सादर करतील.म्हणून, ट्यूमर-संबंधित जनुकांचे विभेदक संकरीकरणाद्वारे तपासणी केली जाऊ शकते.ज्या जनुकांची अभिव्यक्ती प्रेरित आहे त्यांची तपासणी करण्यासाठी इंडक्शन पद्धत देखील वापरली जाऊ शकते.
5. हायब्रिडोमा सेल लाईन्सची निर्मिती आणि स्क्रीनिंग?
प्लीहा बी पेशी + मायलोमा पेशी, सेल फ्यूजनला चालना देण्यासाठी पॉलीथिलीन ग्लायकोल (पीईजी) जोडा आणि HAT माध्यमात वाढलेल्या प्लीहा बी-मायलोमा फ्यूजन पेशी (हायपोक्सॅन्थिन, अमिनोप्टेरिन, टी असलेले) पोषण वाढवत राहतात.सेल फ्यूजनमध्ये हे समाविष्ट आहे: प्लीहा-प्लीहा संलयन पेशी: वाढण्यास अक्षम, प्लीहा पेशी विट्रोमध्ये संवर्धित होऊ शकत नाहीत.हाड-हाड संलयन पेशी: हायपोक्सॅन्थिनचा वापर करू शकत नाहीत, परंतु फोलेट रिडक्टेज वापरून दुसऱ्या मार्गाद्वारे प्युरिनचे संश्लेषण करू शकतात.अमिनोप्टेरिन फोलेट रिडक्टेसला प्रतिबंधित करते आणि त्यामुळे वाढू शकत नाही.हाड-प्लीहा संलयन पेशी: HAT मध्ये वाढू शकतात, प्लीहा पेशी हायपोक्सॅन्थिनचा वापर करू शकतात आणि हाडांच्या पेशी पेशी विभाजन कार्य प्रदान करतात.
6. डिडिओक्सी टर्मिनल टर्मिनेशन मेथड (सेंगर मेथड) द्वारे डीएनएची प्राथमिक रचना ठरवण्याचे तत्त्व आणि पद्धत काय आहे?
डीएनएचा विस्तार संपुष्टात आणण्यासाठी न्यूक्लियोटाइड चेन टर्मिनेटर-2,,3,-डायडॉक्सिन्युक्लियोटाइड वापरणे हे तत्त्व आहे.त्यात 3/5/फॉस्फोडीस्टर बाँड्सच्या निर्मितीसाठी आवश्यक 3-OH नसल्यामुळे, एकदा डीएनए साखळीत समाविष्ट केल्यानंतर, डीएनए साखळी पुढे वाढवता येत नाही.बेस पेअरिंगच्या तत्त्वानुसार, जेव्हा जेव्हा डीएनए पॉलिमरेजला सामान्यपणे विस्तारित डीएनए साखळीत सहभागी होण्यासाठी dNMP ची आवश्यकता असते, तेव्हा दोन शक्यता असतात, एक म्हणजे ddNTP मध्ये सहभागी होणे, ज्यामुळे डीऑक्सीन्यूक्लियोटाइड चेन विस्तार संपुष्टात येतो;दुसरे म्हणजे dNTP मध्ये सहभागी होणे, जेणेकरून पुढील ddNTP अंतर्भूत होईपर्यंत DNA चेन अजून वाढू शकेल.या पद्धतीनुसार, ddNTP मध्ये समाप्त होणार्‍या वेगवेगळ्या लांबीच्या DNA तुकड्यांचा समूह मिळवता येतो.ही पद्धत अनुक्रमे ddAMP, ddGMP, ddCMP आणि ddTMP या चार गटांमध्ये विभागली जाते.प्रतिक्रियेनंतर, पॉलीक्रिलामाइड जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस स्विमिंग बँडनुसार डीएनए अनुक्रम वाचू शकतो.
7. लिप्यंतरणावर एक्टिवेटर प्रोटीन (CAP) चा सकारात्मक नियमन प्रभाव काय आहे?
चक्रीय एडेनिलेट (सीएएमपी) रिसेप्टर प्रोटीन सीआरपी (सीएएमपी रिसेप्टर प्रोटीन), सीएएमपी आणि सीआरपीच्या संयोगाने तयार झालेल्या कॉम्प्लेक्सला सीएपी (सीएएमपीएक्टिव्हेटेड प्रोटीन) म्हणतात.जेव्हा E. coli ची वाढ ग्लुकोज नसलेल्या माध्यमात होते, तेव्हा CAP चे संश्लेषण वाढते आणि CAP मध्ये लैक्टोज (Lac) सारखे प्रवर्तक सक्रिय करण्याचे कार्य असते.काही सीआरपी-आश्रित प्रवर्तकांमध्ये सामान्य प्रवर्तकांकडे असलेले वैशिष्ट्यपूर्ण -35 क्षेत्र अनुक्रम वैशिष्ट्य (TTGACA) नसते.त्यामुळे, RNA पॉलिमरेझला ते बांधणे कठीण आहे.CAP ची उपस्थिती (फंक्शन): एंझाइम आणि प्रवर्तकांच्या बंधनकारक स्थिरतेमध्ये लक्षणीय सुधारणा करू शकते.हे प्रामुख्याने खालील दोन पैलू दर्शविते: ① CAP प्रवर्तकाची रचना आणि एंझाइमशी परस्परसंवाद बदलून एन्झाईम रेणूला योग्यरित्या दिशा देण्यास मदत करते, जेणेकरून -10 प्रदेशाशी संयोग होईल आणि -35 क्षेत्राचे कार्य बदलण्याची भूमिका बजावेल.②CAP RNA पॉलिमरेझचे DNA मधील इतर साइट्सवर बंधन घालण्यास देखील प्रतिबंध करू शकते, ज्यामुळे त्याच्या विशिष्ट प्रवर्तकाला बंधनकारक होण्याची शक्यता वाढते.
8. सामान्यतः डीएनए पुनर्संयोजन प्रयोगामध्ये कोणत्या चरणांचा समावेश केला जातो?
aदात्याच्या जीवाचे लक्ष्य जनुक (किंवा एक्सोजेनस जीन) काढा आणि नवीन रीकॉम्बिनंट डीएनए रेणू तयार करण्यासाठी एनजाइमॅटिकरीत्या दुसर्या डीएनए रेणूशी (क्लोनिंग वेक्टर) कनेक्ट करा.bरिकॉम्बिनंट डीएनए रेणू प्राप्तकर्त्याच्या सेलमध्ये हस्तांतरित करा आणि प्राप्तकर्त्याच्या सेलमध्ये त्याची प्रतिकृती तयार करा आणि जतन करा.या प्रक्रियेला परिवर्तन म्हणतात.cरीकॉम्बीनंट डीएनए शोषून घेतलेल्या प्राप्तकर्त्या पेशींची स्क्रीन करा आणि ओळखा.dपरकीय सहाय्य जनुक व्यक्त केले आहे की नाही हे शोधण्यासाठी रीकॉम्बिनंट डीएनए असलेल्या पेशींचे मास कल्चर.
9. जीन लायब्ररीचे बांधकाम रीकॉम्बिनंट्सच्या तपासणीसाठी तीन पद्धती दिल्या आहेत आणि प्रक्रियेचे थोडक्यात वर्णन केले आहे.
अँटिबायोटिक रेझिस्टन्स स्क्रीनिंग, इन्सर्शनल इनऍक्टिव्हेशन ऑफ रेझिस्टन्स, ब्लू-व्हाइट स्पॉट स्क्रीनिंग किंवा पीसीआर स्क्रीनिंग, डिफरेंशियल स्क्रीनिंग, डीएनए प्रोब बहुतेक क्लोनिंग वेक्टरमध्ये अँटीबायोटिक रेझिस्टन्स जीन्स (अँटी-अँपिसिलिन, टेट्रासाइक्लिन) असतात.जेव्हा प्लाझमिड एस्चेरिचिया कोलीमध्ये हस्तांतरित केले जाते, तेव्हा जीवाणू प्रतिरोधक क्षमता प्राप्त करतात आणि ज्यांचे हस्तांतरण होत नाही त्यांना प्रतिकार नसतो.पण त्याची पुनर्रचना झाली आहे की नाही हे वेगळे करता येत नाही.दोन रेझिस्टन्स जीन्स असलेल्या वेक्टरमध्ये, जर एखाद्या जीनमध्ये परदेशी डीएनए तुकडा घातला गेला आणि जनुक निष्क्रिय केले गेले, तर पॉझिटिव्ह रीकॉम्बिनंट्सची तपासणी करण्यासाठी भिन्न औषधे असलेली दोन प्लेट कंट्रोल्स वापरली जाऊ शकतात.उदाहरणार्थ, pUC प्लास्मिडमध्ये LacZ जनुक (एंकोडिंग β-galactosidase) असतो, जो क्रोमोजेनिक सब्सट्रेट X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) चे विघटन करून निळा तयार करू शकतो, त्यामुळे ताण निळा होतो.जेव्हा परदेशी DNA घातला जातो, तेव्हा LacZ जनुक व्यक्त करता येत नाही, आणि ताण पांढरा असतो, ज्यामुळे रीकॉम्बिनंट बॅक्टेरिया तपासता येतो.
10. भ्रूण स्टेम पेशींद्वारे ट्रान्सजेनिक प्राणी मिळविण्याची मूलभूत प्रक्रिया स्पष्ट करा?
भ्रूण स्टेम पेशी (ES) भ्रूण विकासादरम्यान भ्रूण पेशी असतात, ज्या कृत्रिमरित्या संवर्धित आणि वाढवल्या जाऊ शकतात आणि इतर प्रकारच्या पेशींमध्ये फरक करण्याचे कार्य करतात.ES पेशींची संस्कृती: ब्लास्टोसिस्टच्या आतील पेशींचे वस्तुमान वेगळे आणि सुसंस्कृत असते.जेव्हा ES फीडर-फ्री लेयरमध्ये संवर्धन केले जाते, तेव्हा ते स्नायू पेशी आणि N पेशी यांसारख्या विविध कार्यात्मक पेशींमध्ये भिन्न होते.फायब्रोब्लास्ट्स असलेल्या माध्यमात संवर्धन केल्यावर, ES भेदभाव कार्य राखेल.ES अनुवांशिकरित्या हाताळले जाऊ शकते आणि त्याचे भिन्नता कार्य त्याच्या भिन्नता कार्यावर परिणाम न करता एकत्रित केले जाऊ शकते, जे यादृच्छिक एकीकरणाच्या समस्येचे निराकरण करते.भ्रूण स्टेम पेशींमध्ये एक्सोजेनस जनुकांचा परिचय करून द्या, नंतर गर्भवती मादी उंदरांच्या गर्भाशयात रोपण करा, पिल्लांमध्ये विकसित करा आणि एकसंध उंदीर मिळविण्यासाठी क्रॉस करा.