डायरेक्ट RT-qPCR किट
किटचे वर्णन:
◮ डायरेक्ट RT-qPCR किट, Foreasy Reverse Transcriptase आणि Foreasy HS Taq DNA Polymerase वापरून, Foregene द्वारे विकसित केले जाणारे, अनन्य प्रतिक्रिया बफरसह, हे किट मजबूत प्रतिकार आणि सुसंगततेसह बनवते, आणि ते थेट प्रतिक्रिया चाचणी करू शकते Foregene Lysis प्रणालीचा टेम्पलेट म्हणून वापर.हे किट COVID-19 न्यूक्लिक अॅसिड डिटेक्शन किट आणि इतर पॅथोजेनिक बॅक्टेरिया न्यूक्लिक अॅसिड डिटेक्शन किट डेव्हलपमेंटसाठी अर्ज करू शकते.
वर्णन
डायरेक्ट RT-qPCR किट स्वतंत्रपणे पॅकेज केलेले RT-qPCR बफर आणि उच्च कार्यक्षम एन्झाइम प्रदान करतेमिश्रण (Taq、M-MLV、RI), बॅक-एंड किट्स आणि सिस्टम तयार करण्यासाठी ते सोयीस्कर बनवतेसमायोजन, साध्या पडताळणीमध्ये.
तपशील
500T, 50,000T
किटचे घटक
| किट सामग्री (20 μL प्रतिक्रिया प्रणाली) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| ५०० टी | 50,000 टी | |
| डायरेक्ट एंजाइम मिश्रण | 500 μL×१ | 50 मिली×१ |
| 2× डायरेक्ट RT-qPCR बफर | 1 मिली×५ | 500 मिली×१ |
| सूचना | 1 | 1 |
ऑपरेटिंग पायऱ्या
अभिकर्मक तयार करण्यापूर्वी, किटमधील सर्व अभिकर्मक खोलीच्या तपमानावर वितळले पाहिजेत आणि हळूवारपणे मिसळले पाहिजेत.
A: तयार करा of टेम्पलेट आणि अभिकर्मक
1. तयार केलेले RNA टेम्पलेट तयार करा (RNA टेम्पलेट काढण्यासाठी आणि शुद्ध करण्यासाठी फोरजीन टोटल RNA आयसोलेशन किट मालिका किट वापरण्याची शिफारस केली जाते) किंवा नमुना क्रॅकिंग उत्पादन (फोरजीन लायसिस सिस्टम वापरण्याची शिफारस केली जाते), विशिष्ट प्राइमर्स (10 μM) आणि इतर संबंधित उपभोग्य वस्तू, उपकरणे.
2. 2× डायरेक्ट RT-qPCR बफर, RNase-फ्री ddH2O आणि 20× ROX संदर्भ डाई (जर ते's आवश्यक आहे) बर्फ असलेल्या बॉक्समध्ये, ते नैसर्गिकरित्या वितळतात आणि हळूवारपणे मिसळतात.
B: तयार करा of RT-qPCR प्रणाली
टेबल 1 : तयार करा of RT-qPCR sप्रणाली
| घटक | खंड | अंतिम एकाग्रता |
| 2× डायरेक्ट RT-qPCR बफर | 10 μL | 1× |
| डायरेक्ट एंजाइम मिश्रण | १μL | |
| फॉरवर्ड प्राइमर (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| रिव्हर्स प्राइमर (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| प्रोब (4 μM) | १μL | 200nM |
| टेम्पलेट(आरएनए किंवा लिसेट) | X μL | |
| 20×ROX संदर्भ डाई | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| एकूण खंड | 20μL |
C: सेट करा द RT-qPCR प्रतिक्रिया कार्यक्रम
टेबल 2 : RT-qPCR प्रतिक्रियाon कार्यक्रम सेटिंग (च्या साठी उदाहरण: दोन-पाऊल पद्धत)
| पाऊल | तापमान | वेळ | सायकल | सामग्री | |
| 1 | 50℃ | १५ मि | 1* | 1 | उलट प्रतिलेखन |
| 2 | 95℃ | 1 मिनिट | 1 | प्री-डिनेच्युरेशन | |
| 3 | 95℃ | 10 से | 40-45 | विकृतीकरण | |
| 60℃ | ३० सेकंद २* | एनल/विस्तार | |||
स्टोरेज आणि शेल्फ लाइफ
-किट -20 वर साठवले पाहिजे± 5℃.वैधता कालावधी 12 महिने आहे.
-वारंवार फ्रीझ-थॉ सायकल टाळा (<5 सायकल).
