फोरडायरेक्ट RT-qPCR किट
किटचे वर्णन:
◮आरएनए शुद्धीकरण प्रक्रियेशिवाय स्वॅब संकलनातून थेट रिअल-टाइम प्रवर्धनासाठी.हे किट क्यूआरटी-पीसीआर चक्र एका तासात पूर्ण करते.एन्झाईम मिक्स हे रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस, हॉट-स्टार्ट टाक डीएनए पॉलिमरेझ, आरनेस इनहिबिटरचे ऑप्टिमाइझ केलेले मिश्रण आहे.रिअॅक्शन बफरमध्ये सर्व आवश्यक घटक असतात, ज्यात ऑप्टिमाइझ बफर घटक, Mg2+, dUTP, आणि dNTPs.
वर्णन
ForeDirect RT-qPCR किट RNA शुद्धिकरण प्रक्रियेशिवाय स्वॅब कलेक्शनमधून RNA डायरेक्ट रिअल-टाइम अॅम्प्लीफिकेशनसाठी डिझाइन केले आहे.हे किट क्यूआरटी-पीसीआर चक्र एका तासात पूर्ण करते.एन्झाईम मिक्स हे रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस, हॉट-स्टार्ट टाक डीएनए पॉलिमरेझ, आरनेस इनहिबिटरचे ऑप्टिमाइझ केलेले मिश्रण आहे.रिअॅक्शन बफरमध्ये सर्व आवश्यक घटक असतात, ज्यात ऑप्टिमाइझ बफर घटक, Mg2+, dUTP, आणि dNTPs.
तपशील
100T
किटचे घटक
| न्यूक्लिक अॅसिड रिलीझ एजंट |
| आरएनए संरक्षक |
| 2× RT-qPCR बफर |
| एन्झाइम मिश्रण (Taq&M-MLV) |
| सूचना |
पीसीआर अर्ज
1. एकदा PCR प्रतिक्रिया नळ्या थोड्या वेळासाठी सेंट्रीफ्यूज झाल्यावर, त्या अॅम्प्लीफिकेशन इन्स्ट्रुमेंटच्या सॅम्पल टाकीमध्ये ठेवा.
2. थर्मल प्रोटोकॉल
| पाऊल | तापमान | वेळ | सायकल | |
| 1 | उलट प्रतिलेखन | 50℃ | १५ मि | 1 |
| 2 | प्री-डिनेच्युरेशन | 95℃ | 1 मिनिट | 1 |
| 3 | विकृतीकरण | 95℃ | 10 सेकंद | 42 |
| 4 | एनल/विस्तार | 60℃ | 30 सेकंद | |
टीप:प्रत्येक चक्राच्या विस्ताराच्या चरणानंतर लगेचच फ्लोरोसेंट सिग्नल आढळला.
3. सेट केल्यानंतर, फाइल सेव्ह करा आणि प्रतिक्रिया कार्यक्रम चालवा.
ऑपरेटिंग पायऱ्या
अभिकर्मक तयार करण्यापूर्वी, किटमधील सर्व अभिकर्मक खोलीच्या तपमानावर वितळले पाहिजेत आणि हळूवारपणे मिसळले पाहिजेत.
अभिकर्मक तयारी
1. न्यूक्लिक अॅसिड रिलीझ मिक्स तयार करा
| घटक | प्रति नमुना किंवा नियंत्रण खंड |
| न्यूक्लिक अॅसिड रिलीझ एजंट | 5μL |
| आरएनए संरक्षक | 0.5 μL |
2. प्रतिक्रिया मिश्रण तयार करा
| घटक | प्रति नमुना किंवा नियंत्रण खंड |
| 2× RT-qPCR बफर | 15 μL |
| एन्झाइम मिश्रण (Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
| प्राइमर्स आणि प्रोब्स | 1μL |
स्टोरेज आणि शेल्फ लाइफ
-किट -20 वर साठवले पाहिजे± 5℃.वैधता कालावधी 12 महिने आहे.
-वारंवार फ्रीझ-थॉ सायकल टाळा (<5 सायकल).
