अशुद्ध नमुन्यासाठी 2× एकाग्र प्रीमिक्ससाठी चीन उत्पादक रिअल-टाइम क्वांटिटेटिव्ह पीसीआर डायरेक्ट मल्टीप्लेक्स प्रोब क्यूपीसीआर मिक्स प्लस यू
संस्थेने प्रक्रिया संकल्पना कायम ठेवली आहे “वैज्ञानिक व्यवस्थापन, उच्च गुणवत्ता आणि कार्यक्षमतेची प्राथमिकता, चीन उत्पादकासाठी खरेदीदार सर्वोच्च 2× अशुद्ध नमुना रिअल-टाइम क्वांटिटेटिव्ह पीसीआर डायरेक्ट मल्टीप्लेक्स प्रोब क्यूपीसीआर मिक्स प्लस यू साठी 2× केंद्रित प्रीमिक्ससाठी, आमचा व्यवसाय ग्राहकांना प्रत्येक विशिष्ट आणि सुरक्षित उच्च दर्जाची उत्पादने उपलब्ध करून देण्यास समर्पित आहे.
संस्था प्रक्रिया संकल्पना "वैज्ञानिक व्यवस्थापन, उच्च गुणवत्ता आणि कार्यक्षमतेची प्राथमिकता, खरेदीदारासाठी सर्वोच्चचायना टाक डीएनए पॉलिमरेझ आणि क्यूपीसीआर, आमच्या कंपनीकडे मुबलक सामर्थ्य आहे आणि एक स्थिर आणि परिपूर्ण विक्री नेटवर्क प्रणाली आहे.आमची इच्छा आहे की आम्ही परस्पर फायद्यांच्या आधारावर देश-विदेशातील सर्व ग्राहकांशी चांगले व्यावसायिक संबंध प्रस्थापित करू शकू.
रिअल टाइम पीसीआर प्राइमर डिझाइन तत्त्वे
फॉरवर्ड प्राइमर आणि रिव्हर्स प्राइमर
रिअल टाइम पीसीआरसाठी, प्राइमर डिझाइन खूप महत्वाचे आहे.प्राइमर्स पीसीआर प्रवर्धनाच्या विशिष्टतेशी आणि कार्यक्षमतेशी संबंधित आहेत आणि खालील तत्त्वांच्या संदर्भात डिझाइन केले जाऊ शकतात:
- प्राइमर लांबी: 18-30bp.
- जीसी सामग्री: 40-60%.
- टीएम मूल्य: प्राइमर डिझाइन सॉफ्टवेअर, जसे की प्राइमर 5, प्राइमरचे टीएम मूल्य देऊ शकते.अपस्ट्रीम आणि डाउनस्ट्रीम प्राइमर्सची Tm मूल्ये शक्य तितक्या जवळ असावीत.Tm गणना सूत्र देखील वापरले जाऊ शकते: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR करत असताना, 5 °C च्या प्राइमर Tm मूल्यापेक्षा कमी तापमान सामान्यत: अॅनिलिंग तापमान म्हणून निवडले जाते (अॅनलिंग तापमानातील संबंधित वाढ PCR प्रतिक्रियाची विशिष्टता वाढवू शकते).
- प्राइमर्स आणि पीसीआर उत्पादने:
- डिझाईन प्राइमर पीसीआर प्रवर्धन उत्पादनाची लांबी प्राधान्याने 100-150bp आहे.
- टेम्प्लेटच्या दुय्यम संरचनात्मक क्षेत्रामध्ये डिझाइन प्राइमर्स शक्य तितके टाळले पाहिजेत.
- अपस्ट्रीम आणि डाउनस्ट्रीम प्राइमर्सच्या 3′ टोकांच्या दरम्यान 2 किंवा अधिक पूरक बेस तयार करणे टाळा.
- प्राइमर 3′ टर्मिनल बेस 3 अतिरिक्त सलग G किंवा C सह उपस्थित असू शकत नाही.
- प्राइमरमध्ये स्वतःला पूरक संरचना असू शकत नाही, अन्यथा हेअरपिन रचना तयार होईल, ज्यामुळे पीसीआर प्रवर्धन प्रभावित होईल.
- ATCG प्राइमर अनुक्रमात शक्य तितक्या समान रीतीने वितरित केले जावे आणि 3′ टर्मिनल बेसला T म्हणून टाळावे.
परिशिष्ट1:Cएल डायरेक्टRT-qPCR किट घटकटी पूरक पॅक
1.सेल लिसिस सोल्यूशन
सेल लिसिस सोल्यूशन | |||
किटचे घटक (24-वेल लिसिस सिस्टम / विहीर) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 टी | ५०० टी | ||
भागआय | बफर CL | 20 मि.ली | 100 मि.ली |
फोरजीन प्रोटीज प्लस II | 400 μl | 1 मिली × 2 | |
बफर एस.टी | 1 मिली × 2 | 10 मि.ली | |
भागII | डीएनए इरेजर | 400 μl | 1 मिली × 2 |
आरटी मिक्स | |
किटचे घटक (20 μl प्रतिक्रिया प्रणाली) | DRT-01011-B1 |
200 टी | |
5× डायरेक्ट आरटी मिक्स | 800 μl |
RNase-मुक्त ddH2O | 1.7 मिली × 2 |
qPCR मिक्स | ||
किटचे घटक (20 μl प्रतिक्रिया प्रणाली) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 टी | 1000 टी | |
2× डायरेक्ट qPCR मिक्स-ताकमान | 1 मिली × 2 | 1.7 मिली × 6 |
20× ROX संदर्भ डाई | 40 μl | 200 μl |
RNase-मुक्त ddH2O | 1.7 मिली | 10 मि.ली |
संस्थेने प्रक्रिया संकल्पना कायम ठेवली आहे “वैज्ञानिक व्यवस्थापन, उच्च गुणवत्ता आणि कार्यक्षमतेची प्राथमिकता, चीन उत्पादकासाठी खरेदीदार सर्वोच्च 2× अशुद्ध नमुना रिअल-टाइम क्वांटिटेटिव्ह पीसीआर डायरेक्ट मल्टीप्लेक्स प्रोब क्यूपीसीआर मिक्स प्लस यू साठी 2× केंद्रित प्रीमिक्ससाठी, आमचा व्यवसाय ग्राहकांना प्रत्येक विशिष्ट आणि सुरक्षित उच्च दर्जाची उत्पादने उपलब्ध करून देण्यास समर्पित आहे.
साठी चीन उत्पादकचायना टाक डीएनए पॉलिमरेझ आणि क्यूपीसीआर, आमच्या कंपनीकडे मुबलक सामर्थ्य आहे आणि एक स्थिर आणि परिपूर्ण विक्री नेटवर्क प्रणाली आहे.आमची इच्छा आहे की आम्ही परस्पर फायद्यांच्या आधारावर देश-विदेशातील सर्व ग्राहकांशी चांगले व्यावसायिक संबंध प्रस्थापित करू शकू.
रिअल टाइम पीसीआर प्राइमर डिझाइन तत्त्वे
फॉरवर्ड प्राइमर आणि रिव्हर्स प्राइमर
रिअल टाइम पीसीआरसाठी, प्राइमर डिझाइन खूप महत्वाचे आहे.प्राइमर्स पीसीआर प्रवर्धनाच्या विशिष्टतेशी आणि कार्यक्षमतेशी संबंधित आहेत आणि खालील तत्त्वांच्या संदर्भात डिझाइन केले जाऊ शकतात:
- प्राइमर लांबी: 18-30bp.
- जीसी सामग्री: 40-60%.
- टीएम मूल्य: प्राइमर डिझाइन सॉफ्टवेअर, जसे की प्राइमर 5, प्राइमरचे टीएम मूल्य देऊ शकते.अपस्ट्रीम आणि डाउनस्ट्रीम प्राइमर्सची Tm मूल्ये शक्य तितक्या जवळ असावीत.Tm गणना सूत्र देखील वापरले जाऊ शकते: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR करत असताना, 5 °C च्या प्राइमर Tm मूल्यापेक्षा कमी तापमान सामान्यत: अॅनिलिंग तापमान म्हणून निवडले जाते (अॅनलिंग तापमानातील संबंधित वाढ PCR प्रतिक्रियाची विशिष्टता वाढवू शकते).
- प्राइमर्स आणि पीसीआर उत्पादने:
- डिझाईन प्राइमर पीसीआर प्रवर्धन उत्पादनाची लांबी प्राधान्याने 100-150bp आहे.
- टेम्प्लेटच्या दुय्यम संरचनात्मक क्षेत्रामध्ये डिझाइन प्राइमर्स शक्य तितके टाळले पाहिजेत.
- अपस्ट्रीम आणि डाउनस्ट्रीम प्राइमर्सच्या 3′ टोकांच्या दरम्यान 2 किंवा अधिक पूरक बेस तयार करणे टाळा.
- प्राइमर 3′ टर्मिनल बेस 3 अतिरिक्त सलग G किंवा C सह उपस्थित असू शकत नाही.
- प्राइमरमध्ये स्वतःला पूरक संरचना असू शकत नाही, अन्यथा हेअरपिन रचना तयार होईल, ज्यामुळे पीसीआर प्रवर्धन प्रभावित होईल.
- ATCG प्राइमर अनुक्रमात शक्य तितक्या समान रीतीने वितरित केले जावे आणि 3′ टर्मिनल बेसला T म्हणून टाळावे.
परिशिष्ट1:Cएल डायरेक्टRT-qPCR किट घटकटी पूरक पॅक
1.सेल लिसिस सोल्यूशन
सेल लिसिस सोल्यूशन | |||
किटचे घटक (24-वेल लिसिस सिस्टम / विहीर) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 टी | ५०० टी | ||
भागआय | बफर CL | 20 मि.ली | 100 मि.ली |
फोरजीन प्रोटीज प्लस II | 400 μl | 1 मिली × 2 | |
बफर एस.टी | 1 मिली × 2 | 10 मि.ली | |
भागII | डीएनए इरेजर | 400 μl | 1 मिली × 2 |
आरटी मिक्स | |
किटचे घटक (20 μl प्रतिक्रिया प्रणाली) | DRT-01011-B1 |
200 टी | |
5× डायरेक्ट आरटी मिक्स | 800 μl |
RNase-मुक्त ddH2O | 1.7 मिली × 2 |
qPCR मिक्स | ||
किटचे घटक (20 μl प्रतिक्रिया प्रणाली) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 टी | 1000 टी | |
2× डायरेक्ट qPCR मिक्स-ताकमान | 1 मिली × 2 | 1.7 मिली × 6 |
20× ROX संदर्भ डाई | 40 μl | 200 μl |
RNase-मुक्त ddH2O | 1.7 मिली | 10 मि.ली |
सूचना पुस्तिका: