एमआरएनए लस म्हणजे काय?
एमआरएनए लस विट्रोमध्ये संबंधित बदलांनंतर प्रथिने प्रतिजन व्यक्त करण्यासाठी आणि तयार करण्यासाठी शरीराच्या पेशींमध्ये आरएनए हस्तांतरित करते, ज्यामुळे शरीराला प्रतिजन विरूद्ध रोगप्रतिकारक प्रतिक्रिया निर्माण होते, ज्यामुळे शरीराची रोगप्रतिकारक क्षमता वाढते.[१,३].
आकृती 1: mRNA लसीच्या थेट इंजेक्शनच्या परिणामाचे योजनाबद्ध आकृती [2]
mRNA लसींचे वर्गीकरण
mRNA लसी दोन प्रकारात विभागल्या आहेत:nonreplicatingmRNA आणिस्वयं-प्रवर्धकmRNA: स्व-प्रवर्धक mRNA केवळ लक्ष्य प्रतिजन एन्कोड करत नाही, तर इंट्रासेल्युलर RNA प्रवर्धन आणि प्रथिने अभिव्यक्ती यंत्रणा सक्षम करणारी प्रतिकृती देखील एन्कोड करते.प्रतिकृती न बनवणाऱ्या mRNA लस केवळ लक्ष्य प्रतिजन एन्कोड करतात आणि त्यात 5'आणि 3'अनअनुवादित प्रदेश (UTR) असतात.ते अनुकूलता आणि जन्मजात रोग प्रतिकारशक्तीचे व्यापक उत्तेजन प्रदान करतात, म्हणजे सिटू अँटीजेन अभिव्यक्ती आणि धोक्याचे सिग्नल ट्रान्समिशनमध्ये, आणि खालील अनुप्रयोग वैशिष्ट्ये आहेत[२,३]
●अनुकूलता आणि जन्मजात प्रतिकारशक्तीचे सर्वसमावेशक उत्तेजन प्रदान करू शकते, म्हणजे सिटू प्रतिजन अभिव्यक्ती आणि धोक्याच्या सिग्नल ट्रान्समिशनमध्ये
●"संतुलित" रोगप्रतिकारक प्रतिसाद प्रवृत्त करू शकतो, ज्यामध्ये ह्युमरल आणि सेल्युलर इफेक्टर्स आणि रोगप्रतिकारक स्मरणशक्ती समाविष्ट आहे
●लस तयार करण्याची जटिलता न वाढवता भिन्न प्रतिजन एकत्र करू शकते
● रोगप्रतिकारक क्षमतेची सतत सुधारणा वारंवार लसीकरणाद्वारे साध्य केली जाऊ शकते आणि वाहकाला प्रतिकारशक्ती कमी किंवा कमी प्रतिसाद मिळत नाही
●उष्ण स्थिर mRNA लसी लसींची वाहतूक आणि साठवणूक सुलभ करू शकतात
आकृती 2: mRNA लसीचे योजनाबद्ध आकृती आणि त्याची प्रतिजन अभिव्यक्ती यंत्रणा [४]
mRNA लसींची वैशिष्ट्ये
पारंपारिक लसींच्या तुलनेत, mRNA लसींमध्ये साध्या उत्पादन प्रक्रिया, जलद विकासाचा वेग, सेल कल्चरची गरज नाही आणि कमी किमतीची आहे.डीएनए लसींच्या तुलनेत, एमआरएनए लसींना न्यूक्लियसमध्ये प्रवेश करण्याची आवश्यकता नाही आणि यजमान जीनोममध्ये एकीकरण होण्याचा कोणताही धोका नाही.अर्ध-जीवन बदल करून समायोजित केले जाऊ शकते.
तक्ता 1: mRNA लसींचे फायदे आणि तोटे
|
| फायदा | उणीव |
| mRNA लस | जलद संशोधन आणि विकास, लस निर्मितीला फक्त 40 दिवस लागतात | एक अनावश्यक रोगप्रतिकारक प्रतिसाद ट्रिगर करा
|
| शारीरिक परिस्थितीत mRNA अस्थिरता, कमी करणे सोपे | संभाव्य उपचारात्मक उत्परिवर्तन टाळण्यासाठी जीनोममध्ये समाकलित होणार नाही
| |
| कोणत्याही न्यूक्लियर लोकॅलायझेशन सिग्नल, ट्रान्सक्रिप्शनची गरज नाही | सेफ्टी न्यूक्लियरची प्रभावीता तपासणे बाकी आहे
|
आकृती 3: mRNA लस निर्मिती आणि तयारीचा फ्लो चार्ट [४]
फोरजीन व्हायरल आरएनए अलगाव किट
RT-qPCR सोपे (एक पाऊल)
mRNA लस तयार करण्यासाठी सुधारित धोरणे
mRNA चीच खराब स्थिरता, ऊतींमधील न्यूक्लीजचे सहज ऱ्हास, कमी पेशी प्रवेश कार्यक्षमता आणि कमी भाषांतर कार्यक्षमता यामुळे हे दोष mRNA लसींचा वापर मर्यादित करतात.अनुवादाची कार्यक्षमता देखील खूप महत्त्वाची भूमिका बजावते.वितरण वाहने व्हायरल व्हेक्टर आणि नॉन-व्हायरल वेक्टरमध्ये विभागली जाऊ शकतात (लायपोसोम्स, नॉन-लाइपोसोम्स, व्हायरस, नॅनोपार्टिकल्स इ.).त्यामुळे, संबंधित सुधारणा उपाय आवश्यक आहेत.mRNA तयारीसाठी खालील फार्माकोलॉजिकल सुधारणा धोरण आहे[२]
1 कॅप अॅनालॉग्सचे संश्लेषण करा किंवा mRNA स्थिर करण्यासाठी कॅपिंग एन्झाईम वापरा आणि युकेरियोटिक ट्रान्सलेशन इनिशिएशन फॅक्टर 4E (EIF4E) ला बांधून प्रोटीन ट्रान्सलेशन वाढवा.
2 mRNA स्थिर करण्यासाठी आणि प्रथिने भाषांतर वाढवण्यासाठी 5′-अअनुवादित प्रदेश (UTR) आणि 3′-UTR मधील घटक समायोजित करा
3 Poly(A) शेपूट जोडल्याने mRNA स्थिर होऊ शकते आणि प्रथिने भाषांतर वाढू शकते
4 जन्मजात रोगप्रतिकारक सक्रियता कमी करण्यासाठी आणि अनुवाद वाढवण्यासाठी सुधारित न्यूक्लियोसाइड्स
5 RNase III सह उपचार आणि जलद प्रोटीन लिक्विड क्रोमॅटोग्राफी (FPLC) शुद्धीकरण रोगप्रतिकारक सक्रियता कमी करू शकते आणि भाषांतर वाढवू शकते
6 अनुवाद वाढवण्यासाठी अनुक्रम किंवा कोडन ऑप्टिमाइझ करा
7 भाषांतर आरंभ घटकांचे सह-वितरण आणि भाषांतर आणि इम्युनोजेनिसिटी बदलण्यासाठी इतर पद्धती
आकृती 4: इन विट्रो ट्रान्सक्रिप्शन (IVT) mRNA उत्पादन आणि असेंबली प्रक्रिया [५]
प्लास्मिड डीएनएची मोठ्या प्रमाणावर तयारी
प्लाझमिड डीएनए शुद्धीकरण प्रामुख्याने आरएनए, ओपन-सर्कल डीएनए एंडोटॉक्सिन, यजमान प्रथिने आणि होस्ट न्यूक्लिक अॅसिड यांसारखे दूषित पदार्थ काढून टाकते आणि सामान्यतः रीकॉम्बीनंट प्लाझमिडचे ई. कोलायमध्ये रूपांतर करते.E. coli उच्च-घनता आंबायला ठेवा, नंतर घन-द्रव वेगळे, आणि E. coli गोळा.E. coli नंतर क्षारीय लिसिस, सेंट्रीफ्यूगल सॉलिड-लिक्विड पृथक्करण आणि लिसिस नंतर मायक्रोफिल्ट्रेशन स्पष्टीकरण, अल्ट्राफिल्ट्रेशन आणि स्पष्टीकरणानंतर एकाग्रता आणि नंतर क्रोमॅटोग्राफिक शुद्धीकरणाच्या अधीन आहे.
प्लाझमिड डीएनए शुद्धीकरण:
फोरजीन जनरल प्लाझमिड मिनी किट
【१】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.mRNA疫苗研究进展及挑战[जे].免疫学杂志, 2016(05):446-449.
【2】पारडी एन , होगन एमजे , पोर्टर एफडब्ल्यू , इ.mRNA लस - लसीकरणातील एक नवीन युग[J].नेचर रिव्ह्यूज ड्रग डिस्कव्हरी, 2018.
【3】क्रॅम्प्स टी., एल्बर्स के. (2017) आरएनए लसींचा परिचय.मध्ये: क्रॅम्प्स टी., एल्बर्स के. (एडीएस) आरएनए लस.आण्विक जीवशास्त्रातील पद्धती, खंड 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】मारुग्गी जी, झांग सी, ली जे, इ.संसर्गजन्य रोगांवर नियंत्रण ठेवण्यासाठी लस विकासासाठी एक परिवर्तनीय तंत्रज्ञान म्हणून mRNA[J].आण्विक थेरपी, 2019.
【5】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, , जन्मजात/अॅडॉप्टिव्ह इम्यून रिस्पॉन्स संतुलित करण्यासाठी mRNA लस तयार करणे, आण्विक औषधातील ट्रेंड्स, खंड 26, अंक 3,2020, पृष्ठ 311-323.
पोस्ट वेळ: ऑगस्ट-05-2021
