पीसीआरचा जन्म
पीसीआर (पॉलिमरेझ चेन रिअॅक्शन)
पॉलिमरेझ चेन रिअॅक्शनचा शोध लागल्यानंतर 30 वर्षांहून अधिक काळ लोटला आहे.30 वर्षांहून अधिक काळ, जगभरातील असंख्य विद्वानांनी पूरक आणि सुधारणे सुरू ठेवल्यानंतर, संपूर्ण जीवन विज्ञान क्षेत्रात पीसीआर तंत्रज्ञान ही सर्वात व्यापक आणि वारंवार वापरली जाणारी आणि सर्वात महत्त्वाची मूलभूत संशोधन पद्धत बनली आहे.
पारंपारिक पीसीआर तंत्रज्ञानाच्या व्यापक वापराच्या आधारे विकसित केलेले टचडाउन पीसीआर, रिअल-टाइम पीसीआर, मल्टी पीसीआर, इत्यादी, तसेच नव्याने उदयास आलेल्या डिजिटल पीसीआर (डिजिटल पीसीआर) ने बहुसंख्य वैज्ञानिक संशोधकांच्या संशोधन पद्धती मोठ्या प्रमाणात समृद्ध केल्या आहेत आणि आधुनिक जीवन विज्ञानांच्या विकास प्रक्रियेला मोठ्या प्रमाणात गती दिली आहे, विशेषत: संपूर्ण मानवीय जीवनाच्या अणुविज्ञानाच्या अभ्यासात आणि मानवी जीवनाचा मोठा वाटा आहे.
पारंपारिक पीसीआर तंत्रज्ञानाचे दोष
कॉम्प्लेक्स न्यूक्लिक अॅसिड पृथक्करण आणिकाढणे:
★ पारंपारिक पीसीआर तंत्रज्ञान: आवश्यक
★ पीसीआर व्युत्पन्न तंत्रज्ञान: आवश्यक
★ DNA आणि RNA नमुने: मोठे फरक, कठीण ऑपरेशन आवश्यकता
★ शरीराचे धोके: विषारी अभिकर्मक शरीराला हानी पोहोचवतात
पारंपारिक पीसीआर तंत्रज्ञान आणि व्युत्पन्न तंत्रज्ञानाची पूर्व-आवश्यकता आहे-न्यूक्लिक अॅसिड वेगळे करणे आणि शुद्धीकरण
पीसीआर तंत्रज्ञानाच्या गरजा पूर्ण करणारे न्यूक्लिक अॅसिड नमुने मिळविण्यासाठी कोणत्याही जैविक नमुन्याला क्लिष्ट आणि त्रासदायक नमुना प्रक्रियेच्या मालिकेतून जावे लागते.
डीएनए आणि आरएनए वेगळे करणे आणि काढणे हे नेहमीच एक मूलभूत कार्य आहे जे संबंधित वैज्ञानिक संशोधकांना दररोज पुनरावृत्ती करणे आवश्यक आहे.
नमुन्यांमधील प्रचंड फरकांमुळे, डीएनए आणि आरएनएचे पृथक्करण आणि निष्कर्षण प्रक्रिया देखील खूप भिन्न आहेत.या कामासाठी ऑपरेटरसाठी उच्च पातळीवरील तांत्रिक प्रवीणता आवश्यक आहे.पारंपारिक पृथक्करण आणि निष्कर्षण तंत्रांना काही अत्यंत विषारी रासायनिक अभिकर्मकांशी दीर्घकालीन संपर्क आवश्यक असतो.यामुळे ऑपरेटरच्या शरीराला अपरिवर्तनीय नुकसान होईल आणि प्रयोगादरम्यान थेट नुकसान देखील होईल.
त्याच वेळी, ज्यांच्याकडे मोठ्या संख्येने नमुने आहेत त्यांचा अभ्यास करण्यासाठी, न्यूक्लिक अॅसिड वेगळे करणे आणि काढणे हे श्रम-केंद्रित कार्य आहे.
बाजारात न्यूक्लिक अॅसिड आयसोलेशन आणि एक्सट्रॅक्शन किट आता परिपक्व आहेत आणि बरेच ब्रँड आहेत, परंतु ते अंदाजे समान आहेत.सिलिका जेल मेम्ब्रेन कॉलम सेंट्रीफ्यूगल किट असो किंवा मॅग्नेटिक बीड मेथड किट असो, ते खूप वेळ घेते आणि महाग असते.किटच्या खर्चाव्यतिरिक्त, प्रयोगशाळेच्या उपकरणांसाठी विशेष आवश्यकता देखील आहेत.चुंबकीय मणी पद्धतीमध्ये वापरले जाणारे स्वयंचलित वर्कस्टेशन हे एक अतिशय वैशिष्ट्यपूर्ण मोठ्या प्रमाणातील उच्च-मूल्याचे उपकरण आहे, जे प्रयोगशाळेसाठी खूप मोठा खर्च आहे.
सारांश
पीसीआर प्रयोग करण्यापूर्वी, नमुन्यांची पूर्व-उपचार करणे ही संशोधकांसाठी अपरिहार्य आणि नेहमीच डोकेदुखी असते.ही समस्या कशी सोडवायची आणि न्यूक्लिक अॅसिड वेगळे केल्याशिवाय आणि काढल्याशिवाय पीसीआर प्रयोग केले जाऊ शकतात की नाही हे बहुसंख्य वैज्ञानिक संशोधक आणि क्लिनिकल प्रयोगशाळेतील कर्मचार्‍यांचा नेहमीच विचार असतो.
फोरजीनचे उपाय
डायरेक्ट पीसीआर तंत्रज्ञान आणि संबंधित किट्सवर अनेक वर्षांच्या परिश्रमपूर्वक संशोधनानंतर, फोर्जेनने अनेक अडथळे यशस्वीपणे सोडवले आणि मजबूत प्रतिकार आणि अनुकूलतेसह अनेक प्रकारच्या विविध नमुन्यांसाठी थेट पीसीआर यशस्वीरित्या साध्य केले, ज्यामुळे संशोधकांना अवजड आणि धोकादायक वेगळे करणे आणि न्यूक्लिक अॅसिड काढणे यापासून मुक्तता मिळू शकते.यामुळे प्रत्येकाच्या श्रमाची तीव्रता मोठ्या प्रमाणात कमी होईल, प्रयोग प्रक्रियेला गती मिळेल आणि वैज्ञानिक संशोधन आणि चाचणी खर्च वाचेल.
डायरेक्टपीसीआरबद्दल फोर्जेनची समज आणि ज्ञान
प्रथम, डायरेक्टपीसीआर तंत्रज्ञान विविध जैविक नमुना ऊतकांसाठी थेट पीसीआर तंत्रज्ञान आहे.या तांत्रिक स्थितीनुसार, न्यूक्लिक अॅसिड वेगळे करण्याची आणि काढण्याची गरज नाही, आणि ऊतक नमुना थेट ऑब्जेक्ट म्हणून वापरला जातो आणि PCR प्रतिक्रियासाठी लक्ष्य जनुक प्राइमर्स जोडले जातात.
दुसरे, डायरेक्टपीसीआर तंत्रज्ञान हे केवळ पारंपारिक डीएनए टेम्प्लेट अॅम्प्लिफिकेशन तंत्रज्ञान नाही तर त्यात आरएनए टेम्पलेट रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन पीसीआर देखील समाविष्ट आहे.
तिसरे, डायरेक्टपीसीआर तंत्रज्ञान केवळ ऊतींच्या नमुन्यांवर नियमित गुणात्मक पीसीआर प्रतिक्रियाच करत नाही, तर रिअल-टाइम क्यूपीसीआर प्रतिक्रिया देखील समाविष्ट करते, ज्यासाठी प्रतिक्रिया प्रणालीमध्ये पार्श्वभूमी फ्लूरोसेन्स हस्तक्षेपाचा प्रतिकार करण्याची आणि अंतर्जात फ्लूरोसेन्स क्वेंचर्सला विरोध करण्याची मजबूत क्षमता असणे आवश्यक आहे.
चौथे, डायरेक्टपीसीआर तंत्रज्ञानाद्वारे लक्ष्यित केलेल्या ऊतींचे नमुने केवळ न्यूक्लिक अॅसिड टेम्पलेट्स सोडण्याची आवश्यकता असते आणि पीसीआर प्रतिक्रियेमध्ये व्यत्यय आणणारी प्रथिने, पॉलिसेकेराइड्स, मीठ आयन इ. काढून टाकत नाहीत.यासाठी प्रतिक्रिया प्रणालीमध्ये न्यूक्लिक अॅसिड पॉलिमरेझ आणि पीसीआर मिक्सची उत्कृष्ट अँटी-रिव्हर्सिबिलिटी आणि अनुकूलता असणे आवश्यक आहे आणि जटिल परिस्थितीत एन्झाईम क्रियाकलाप आणि प्रतिकृती अचूकता सुनिश्चित करू शकतात.
पाचवे, डायरेक्टपीसीआर तंत्रज्ञानाद्वारे लक्ष्यित केलेल्या ऊतींचे नमुने कोणत्याही न्यूक्लिक अॅसिड संवर्धन उपचारांच्या अधीन केले गेले नाहीत आणि टेम्पलेटचे प्रमाण खूपच कमी आहे, ज्यासाठी अत्यंत उच्च संवेदनशीलता आणि प्रतिक्रिया प्रणालीची प्रवर्धन कार्यक्षमता आवश्यक आहे.
निष्कर्ष
डायरेक्टपीसीआर तंत्रज्ञान हे पीसीआर तंत्रज्ञानाच्या जन्मापासून गेल्या 30 वर्षांतील सर्वात महत्त्वाच्या तांत्रिक विकास आणि नवकल्पनांपैकी एक आहे.फोर्जेन या तंत्रज्ञानाचा प्रवर्तक आणि नवोदित आहे आणि राहील.
डायरेक्टपीसीआर तंत्रज्ञानाच्या अनुप्रयोगाची शक्यता खूप विस्तृत आहे.या तंत्रज्ञानाच्या निरंतर सुधारणा आणि जाहिरातीमुळे वैज्ञानिक संशोधन आणि तपासणी कार्यात नक्कीच विध्वंसक बदल घडून येतील.ही पीसीआर तंत्रज्ञान क्रांती आहे.
पोस्ट वेळ: फेब्रुवारी-21-2017
