न्यूक्लिक अॅसिड चाचणी प्रयोगशाळांमध्ये पीसीआर पद्धती आणि न्यूक्लिक अॅसिड एरोसोल दूषित होणे या नाण्याच्या दोन बाजू आहेत.आम्ही फक्त ते असणे किंवा नसणे निवडू शकतो, परंतु आम्हाला ते हवे आहे की ते खर्च करायचे आहे हे आम्ही निवडू शकत नाही.
1. डीएनए रिमूव्हरचे स्क्रीनिंग
न्यूक्लिक अॅसिड एरोसोल दूषित होण्याचे अवकाशीय काढणे साध्य करण्यासाठी, प्रथम डीएनए रिमूव्हर्सची तपासणी करणे आवश्यक आहे जे द्रव स्थितीत न्यूक्लिक अॅसिड काढून टाकू शकतात.कारण खरोखर कार्य करणारे बरेच डीएनए रिमूव्हर्स नाहीत.प्रायोगिक पद्धतीसाठी, कृपया पहा: डीएनए रिमूव्हर प्रयोगशाळेचा "गुप्त कोपरा" असू शकत नाही!
या प्रयोगात, ASFV प्लास्मिड आणि डीएनए रिमूव्हरच्या 100 प्रती/μL (CT अंदाजे 31) डिजिटल PCR द्वारे परिमाणित केले गेले आणि समान प्रमाणात मिसळले गेले आणि नंतर खोलीच्या तापमानावर अनुक्रमे 10 मिनिटे, 20 मिनिटे आणि 30 मिनिटे प्रतिक्रिया दिली.न्यूक्लिक अॅसिड काढल्यानंतर, qPCR प्रवर्धन केले गेले.प्लाझमिड आणि पाणी मिश्रित सकारात्मक नियंत्रणाची तुलना केली गेली.प्रयोग एकाच वेळी पूर्ण झाला नसल्यामुळे, परिणामांमध्ये काही विचलन असू शकते, परंतु त्याचा प्रयोगाच्या निष्कर्षावर परिणाम होत नाही.आतापर्यंत, मी 10 व्यावसायिक डीएनए रिमूव्हर उत्पादनांचे मूल्यांकन केले आहे.केवळ क्रमांक 1, क्रमांक 6 आणि क्रमांक 8 उत्पादने द्रव अवस्थेत प्लास्मिड डीएनए प्रभावीपणे खराब करू शकतात.इतर उत्पादनांचा जवळजवळ कोणताही परिणाम होत नाही.
तक्ता 1 व्यावसायिकरित्या उपलब्ध डीएनए रिमूव्हरचा न्यूक्लिक अॅसिड काढण्याचा प्रभाव
2. सामान्यतः वापरल्या जाणार्या जंतुनाशकांचा डीएनए काढण्याचा परिणाम प्रयोग
1. सामान्यतः वापरल्या जाणार्या जंतुनाशकांची तपासणी
प्रयोगशाळांमध्ये सामान्यतः वापरले जाणारे अनेक प्रकारचे जंतुनाशक आहेत: अॅल्डिहाइड्स, फिनॉल्स, अल्कोहोल, क्वाटरनरी अमोनियम लवण, पेरोक्साइड्स, क्लोरीन तयारी आणि ऍसिड आणि बेस.सूक्ष्मजीवांवर या जंतुनाशकांचे निर्जंतुकीकरण प्रभाव पूर्णपणे प्रयोगांद्वारे सत्यापित केले गेले आहेत, परंतु न्यूक्लिक अॅसिडच्या ऱ्हास परिणामावर पुरेसा प्रायोगिक डेटा नाही.न्यूक्लिक अॅसिड चाचणी प्रयोगशाळांना अशा जंतुनाशकाची आवश्यकता असते ज्याचा सूक्ष्मजीवांवर केवळ चांगला निर्जंतुकीकरण प्रभाव पडत नाही तर डीएनए खराब होऊ शकतो.चाचणी परिणाम दर्शवितात की 84 जंतुनाशक आणि ट्रायक्लोरोइसोसायन्युरिक ऍसिड आणि 1 एम हायड्रोक्लोरिक ऍसिडची फक्त दोन क्लोरीन तयारी आवश्यकता पूर्ण करतात.1 एम हायड्रोक्लोरिक ऍसिड हे अत्यंत संक्षारक असल्याने, न्यूक्लिक ऍसिड चाचणी प्रयोगशाळांमध्ये क्लोरीनची तयारी कचरा विल्हेवाट म्हणून वापरण्याची शिफारस केली जाते.तथापि, क्लोरीनची तयारी धातूंना गंजणारी असते आणि ती उपकरणे आणि उपकरणांच्या निर्जंतुकीकरणासाठी वापरली जाऊ शकत नाही.
तक्ता 2 विविध प्रकारच्या जंतुनाशकांचे डीएनए काढण्याचे परिणाम
2. क्लोरीन तयारीची किमान प्रभावी एकाग्रता
क्लोरीन-आधारित जंतुनाशकांचा मजबूत DNA ऱ्हास प्रभाव असतो, परंतु त्यांच्या धातूचा गंज आणि चिडचिड झाल्यामुळे, ते फरशी, नॉन-मेटल काउंटरटॉप्स, भिजवण्याच्या टिपा, सेंट्रीफ्यूज ट्यूब आणि इतर चाचणी वस्तू साफ करण्यासाठी वापरले जाऊ शकतात.
"नवीन कोरोनरी न्यूमोनिया महामारी निर्जंतुकीकरण तांत्रिक मार्गदर्शक तत्त्वे" नुसार: प्रदूषक (रुग्णांचे रक्त, स्राव आणि उलट्या) उपलब्ध क्लोरीन 5g/L-10g/L क्लोरीन युक्त जंतुनाशक;मजले, भिंती आणि वस्तू पृष्ठभाग उपलब्ध क्लोरीन 1g/L क्लोरीन जंतुनाशक वापरतात: कपडे, बेडिंग आणि इतर कापड प्रथम 0.5g/L उपलब्ध क्लोरीन असलेल्या क्लोरीन जंतुनाशकामध्ये 30 मिनिटांसाठी भिजवले जातात आणि नंतर नेहमीप्रमाणे स्वच्छ केले जातात.
तक्ता 3 क्लोरीन जंतुनाशकांच्या विविध सांद्रतेचा डीएनए काढण्याचा प्रभाव
चाचणी परिणाम दर्शवितात की: जेव्हा प्रभावी क्लोरीन एकाग्रता 1.2 g/L पेक्षा जास्त किंवा समान असते, तेव्हा क्लोरीनयुक्त जंतुनाशक 5 मिनिटांसाठी वापरल्यास 100 प्रती/μL प्लाझमिड पूर्णपणे खराब करू शकतात.10 मिनिटे काम करताना, 0.6 g/L पेक्षा जास्त किंवा त्यापेक्षा जास्त प्रभावी क्लोरीन सांद्रता असलेले 84 जंतुनाशक प्लास्मिड्सच्या 100 प्रती/μL पूर्णपणे खराब करू शकतात.
3. न्यूक्लिक अॅसिड एरोसोलद्वारे प्रदूषित हवा काढून टाकण्याचा प्रयोग
न्यूक्लिक अॅसिड एरोसोलद्वारे प्रदूषित हवा कशी स्वच्छ करावी?एरोसोल-दूषित वातावरण तयार करणे आणि नंतर ते स्वच्छ करणे किंवा दूषित झाल्यानंतर न्यूक्लिक अॅसिड साफ करणे हे बहुतेक विचार आहेत.माझ्यासाठी, एक प्रयोग ज्याची पुनरावृत्ती होऊ शकत नाही आणि प्रयोगाच्या परिणामांचे परिमाणवाचक विश्लेषण केले जाऊ शकत नाही ते निरर्थक आहे, म्हणून मी जंतुनाशक वायु निर्जंतुकीकरणाच्या काही पद्धती उधार घेतल्या आहेत."GB27948-2020 हवा जंतुनाशकांसाठी सामान्य आवश्यकता" आणि "निर्जंतुकीकरण तांत्रिक तपशील" पहा
1. चाचणी साहित्य
1.1 डीएनए रिमूव्हर: या प्रयोगात, टेबल 1 मधील दोन व्यावसायिकरित्या उपलब्ध डीएनए रिमूव्हर 6 आणि 8 निवडले गेले.
1.2 चाचणी प्लाझमिड: बहुतेक प्रयोगशाळेतील प्रदूषणाचे CT मूल्य 30 पेक्षा जास्त असेल हे लक्षात घेता, यावेळी वापरलेल्या ASFV जनुक प्लाझमिडची एकाग्रता सुमारे 100 प्रती/μL आहे आणि फ्लोरोसेंट परिमाणात्मक PCR CT सुमारे 31.07 आहे.फ्लॉकिंग कॉटन स्बॅबमध्ये प्लाझमिड घाला आणि हवा कोरडी करा.
1.3 चाचणी साधन: बिलिंगकेहान KVBOX निर्जंतुकीकरण साधन, ज्याला शेन्झेन रनलियन एन्व्हायर्नमेंटल टेक्नॉलॉजी कंपनी, लिमिटेड द्वारे समर्थन दिले जाते, हायड्रोजन पेरॉक्साइड जंतुनाशकासह उत्कृष्ट हवा निर्जंतुकीकरण कार्यप्रदर्शन आहे, आणि प्रभावीपणे बीजाणू आणि इतर सूक्ष्मजीव नष्ट करू शकतात.
1.4 चाचणी जागा: सुमारे 0.1 क्यूबिक मीटरची बंद हस्तांतरण विंडो.
2. चाचणी पद्धत
निर्जंतुकीकरण यंत्रावर सेट केलेल्या जंतुनाशकाची मात्रा 10ml आहे आणि एकाग्रता 100ml/m3 आहे, जी "GB27948-2020 हवा जंतुनाशकांसाठी सामान्य आवश्यकता" पेक्षा खूप जास्त आहे: एरोसोल स्प्रे निर्जंतुकीकरण वापरताना, जंतुनाशकाचे प्रमाण ≤10 ml/m3 असावे.
फवारणीनंतर, ते 2 तासांसाठी सील केले गेले आणि नंतर प्लाझमिडसह फ्लॉक्ड स्वॅब TE सह एल्युट केले गेले आणि फ्लॉक्ड स्वॅब विना फ्युमिगेशन प्लॅस्मिडसह सेट केले गेले.शोधण्यासाठी फ्लोरोसेन्स परिमाणात्मक पीसीआर पद्धत वापरा.
तक्ता 4 एअर न्यूक्लिक अॅसिड काढण्याची चाचणी परिणाम
3. चाचणी परिणाम
दोन प्रकारचे डीएनए रिमूव्हर्स जे द्रव अवस्थेत प्लाझमिड्स प्रभावीपणे खराब करू शकतात त्यांचा एअर न्यूक्लिक अॅसिड काढण्याच्या प्रयोगात अजिबात परिणाम होत नाही.न्यूक्लिक अॅसिड चाचणी प्रयोगशाळांमध्ये न्यूक्लिक अॅसिड एरोसोल प्रदूषणाची समस्या पूर्णपणे सोडवण्यासाठी हवेतील न्यूक्लिक अॅसिड एरोसोल प्रदूषण दूर करण्यासाठी वापरला जाऊ शकतो असा उपाय शोधण्यासाठी मी उत्सुक आहे, परंतु सध्या असे कोणतेही उत्पादन सापडले नाही.मला विश्वास आहे की भविष्यात, उच्च-कार्यक्षमता असलेले न्यूक्लिक अॅसिड रिमूव्हर्स असतील ज्याचा वापर एअर न्यूक्लिक अॅसिड काढण्यासाठी केला जाऊ शकतो.
4. भ्रम सोडून द्या आणि प्रतिबंधावर लक्ष केंद्रित करा
कंपन्या त्यांच्या न्यूक्लिक अॅसिड काढून टाकण्याच्या उत्पादनांबद्दल कितीही बढाई मारत असली तरी, मी सुचवितो की न्यूक्लिक अॅसिड चाचणीत गुंतलेल्या बहुसंख्य मित्रांनी एकदा आणि सर्व भ्रम सोडून द्या आणि वास्तविकता ओळखा: न्यूक्लिक अॅसिड एरोसोलद्वारे प्रदूषित हवा काढून टाकणे किंवा ठोस प्रतिबंधात्मक उपाय घेणे आणि दैनंदिन देखरेखीचे काम करणे खूप कठीण आहे!
पोस्ट वेळ: सप्टेंबर-10-2021