1: प्रायोगिक पुरवठा वेळेत बदला

(NTC) नकारात्मक नियंत्रण सेट करा आणि ते अनेक वेळा पुन्हा करा.प्रयोगशाळेत पीसीआर उत्पादन दूषित असल्याचे आढळल्यानंतर, सर्व प्रायोगिक पुरवठा वेळेत बदला.जसे की: प्राइमर पुन्हा पातळ करा आणि तयार करा, विंदुक टीप, EP ट्यूब, ddH2O, इत्यादी पुन्हा निर्जंतुक करा, नवीन विंदुकाने बदला आणि PCR प्रयोग करण्यासाठी तात्पुरते इतर प्रयोगशाळा उधार घ्या.दूषित प्रयोगशाळेला हवेशीर आणि अल्ट्राव्हायोलेट किरणांनी विकिरणित केले पाहिजे जोपर्यंत PCR उत्पादनाची दूषितता प्रयोगास पुढे जाण्यापूर्वी काढून टाकली जात नाही.

2: यूव्ही एक्सपोजर वेळ वाढवा

हे लक्षात घेण्यासारखे आहे की डीएनए दूषितता काढून टाकण्यासाठी, नियमित अल्ट्राव्हायोलेट विकिरण नेहमीपेक्षा 2 तासांनी वाढवले ​​पाहिजे.असे असले तरी, DNA दूषिततेचे छोटे तुकडे (200bp खाली) काढून टाकण्यावर अतिनील विकिरणाचा प्रभाव अजूनही चांगला नाही.

अल्ट्राव्हायोलेट तरंगलांबी (nm) साधारणपणे 254/300nm असते आणि ती 30 मिनिटांसाठी विकिरण करण्यासाठी पुरेसे असते.हे लक्षात घ्यावे की अवशिष्ट पीसीआर उत्पादनांचे दूषितीकरण दूर करण्यासाठी यूव्ही निवडताना, पीसीआर उत्पादनाची लांबी आणि उत्पादन अनुक्रमातील बेसचे वितरण विचारात घेतले पाहिजे.अतिनील विकिरण केवळ 500 bp वरील लांब तुकड्यांसाठी प्रभावी आहे आणि लहान तुकड्यांवर फारसा प्रभाव पडत नाही.

अतिनील विकिरण दरम्यान, पीसीआर उत्पादनातील पायरीमिडीन बेस डायमर बनतील.हे डायमर्स विस्तार संपुष्टात आणू शकतात, परंतु डीएनए साखळीतील सर्व पायरीमिडीन डायमर बनवू शकत नाहीत आणि अतिनील विकिरण देखील डायमर खंडित करू शकतात..डायमर निर्मितीची डिग्री यूव्ही तरंगलांबी, पायरीमिडीन डायमरचा प्रकार आणि डायमर साइटला लागून असलेल्या न्यूक्लियोटाइड्सच्या क्रमावर अवलंबून असते.म्हणून, जर पीसीआर प्रवर्धित तुकडे लहान असतील तर UNG अँटी-पीसीआर उत्पादन दूषित प्रणाली वापरण्याची शिफारस केली जाते.

3: सामान्यतः वापरलेले DNA प्रदूषण स्कॅव्हेंजर

जेव्हा पिपेट्स जोडले जातात तेव्हा एरोसोल सहजपणे तयार होतात, जे टाळणे कठीण आहे आणि ते त्वरीत स्थिर होईल.त्यामुळे, डीएनए प्रदूषणाचा प्रसार रोखण्यासाठी विशेष डीएनए प्रदूषण स्कॅव्हेंजर्सचा वारंवार वापर करणे हा निःसंशयपणे चांगला पर्याय आहे.

4: UNG प्रदूषण विरोधी प्रणाली वापरा

पीसीआर उत्पादनाची दूषितता काढून टाकल्यानंतर, चाचणी प्रयोगशाळा पीसीआर उत्पादनाची दूषितता टाळण्यासाठी UNG अँटी-पीसीआर उत्पादन दूषित प्रणाली वापरू शकते.सामान्य प्रयोगशाळांमध्ये, तुम्ही साधी प्रायोगिक विभाजने करू शकता, PCR उत्पादन क्षेत्र इतर क्षेत्रांपासून काटेकोरपणे वेगळे करू शकता, काही प्रयोगशाळेचे नियम आणि नियम स्थापित करू शकता आणि PCR उत्पादनाची दूषित घटना टाळण्यासाठी संबंधित प्रशिक्षण आयोजित करू शकता.

शिफारशी: वाजवी पीसीआर प्रयोगशाळेची स्थापना करणे, चांगले पीसीआर वातावरण राखणे, मानक पीसीआर कार्यपद्धती तयार करणे आणि प्रयोगकर्त्यांची कठोर ऑपरेटिंग जागरूकता विकसित करणे या पीसीआर प्रयोगांचे प्रदूषण रोखण्यासाठी किंवा कमी करण्याच्या चाव्या आहेत.