• फेसबुक
  • लिंक्डइन
  • YouTube

उद्रेकाच्या सुरुवातीच्या टप्प्यात, जलद विकासामुळे, संशयित रूग्णांचे जलद निदान करणे ही कोविड-19 रोखण्याची गुरुकिल्ली आहे.काही मान्यताप्राप्त न्यूक्लिक अॅसिड डिटेक्शन अभिकर्मकांचा विकास कालावधी कमी असतो, आणि घाईघाईने कार्यप्रदर्शन पुष्टीकरण, अपुरा अभिकर्मक ऑप्टिमायझेशन आणि बॅचमधील मोठे फरक यासारख्या समस्या आहेत;न्यूक्लिक अॅसिड शोधण्याच्या प्रक्रियेच्या विविध पैलूंमधील विविध क्लिनिकल प्रयोगशाळांच्या समस्या देखील न्यूक्लिक अॅसिड शोध परिणामांच्या अचूकतेवर परिणाम करू शकतात.हा लेख सध्याच्या SARS-CoV-2 न्यूक्लिक अॅसिड शोधातील मुख्य दुवे आणि मुद्द्यांवर लक्ष केंद्रित करेल आणि प्रयोगशाळेतील न्यूक्लिक अॅसिड शोध आणि क्लिनिकल विसंगतीच्या खोट्या नकारात्मक आणि सकारात्मक पुनर्तपासणीच्या समस्यांचे विश्लेषण करेल.

SARS-CoV-2 न्यूक्लिक अॅसिड शोधण्याची तत्त्वे

SARS-CoV-2 हा एक आरएनए विषाणू आहे ज्याचा जीनोम अनुक्रम सुमारे 29 kb आहे, 10 जनुकांसह, जे प्रभावीपणे 10 प्रथिने एन्कोड करू शकतात.व्हायरस आरएनए आणि प्रथिने बनलेले असतात आणि सर्वात बाहेरील थर लिपिड्स आणि ग्लायकोप्रोटीन्सने बनलेला बाह्य आवरण असतो.आतमध्ये, प्रथिने कॅप्सिड आरएनएला गुंडाळते, ज्यामुळे सहज विघटन होऊ शकणार्‍या आरएनए (P1) चे संरक्षण होते.

zfgd

P1 SARS-COV-2 ची रचना

विषाणू संक्रमणास कारणीभूत ठरण्यासाठी विशिष्ट पेशींच्या पृष्ठभागाच्या रिसेप्टर्सद्वारे पेशींवर आक्रमण करतात आणि प्रतिकृती तयार करण्यासाठी यजमान पेशींचा वापर करतात.

व्हायरल न्यूक्लिक अॅसिड शोधण्याचे तत्त्व म्हणजे सेल लाइसेटद्वारे व्हायरल आरएनए उघड करणे आणि नंतर शोधण्यासाठी रिअल-टाइम फ्लोरोसेंट रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन-पॉलिमरेझ चेन रिएक्शन (RT-PCR) वापरणे.

शोध तत्त्वाची गुरुकिल्ली म्हणजे न्यूक्लिक अॅसिड अनुक्रमांचे "लक्ष्यित जुळणी" साध्य करण्यासाठी प्राइमर्स आणि प्रोबचा वापर करणे, म्हणजेच SARS-CoV-2 चा न्यूक्लिक अॅसिड क्रम शोधणे जो सुमारे 30,000 बेसमध्ये इतर व्हायरसपेक्षा वेगळा आहे (न्यूक्लिक अॅसिडचे इतर व्हायरसशी समानता), "प्राइम एरिया" आणि प्रोब डिझाइन.

प्राइमर्स आणि प्रोब SARS-CoV-2 न्यूक्लिक अॅसिडच्या विशिष्ट प्रदेशाशी अत्यंत जुळतात, म्हणजेच विशिष्टता खूप मजबूत आहे.चाचणी करायच्या नमुन्याचा रिअल-टाइम फ्लोरोसेंट आरटी-पीसीआर अॅम्प्लीफिकेशन निकाल पॉझिटिव्ह आला की, नमुन्यात SARS-CoV-2 उपस्थित असल्याचे सिद्ध होते.P2 पहा.

zfgd2

SARS-CoV-2 न्यूक्लिक अॅसिड निर्धाराचे P2 चरण (रिअल-टाइम फ्लोरोसेंट RT-PCR)

SARS-CoV-2 न्यूक्लिक अॅसिड शोधण्यासाठी प्रयोगशाळेच्या अटी आणि आवश्यकता

न्यूक्लिक अॅसिड चाचणी प्रयोगशाळा नकारात्मक दबाव वातावरणासाठी सर्वात आदर्श आहेत आणि त्यांनी दबाव निरीक्षणाकडे लक्ष दिले पाहिजे, हवा वाहते ठेवली पाहिजे आणि एरोसोल काढून टाकले पाहिजे.न्यूक्लिक अॅसिड चाचणी कर्मचार्‍यांकडे संबंधित पात्रता असणे आवश्यक आहे, त्यांनी संबंधित पॉलिमरेझ चेन रिएक्शन प्रशिक्षण घेतले पाहिजे आणि मूल्यांकन उत्तीर्ण केले पाहिजे.प्रयोगशाळेचे काटेकोरपणे व्यवस्थापन केले जावे, जागी झोन ​​केले जावे आणि असंबद्ध कर्मचार्‍यांना आत जाण्यास सक्त मनाई आहे.स्वच्छ क्षेत्र हवेशीर आणि जागी निर्जंतुक केले पाहिजे.संबंधित वस्तू झोनमध्ये ठेवल्या जातात, स्वच्छ आणि घाणेरडे वेगळे केले जातात, वेळेवर बदलले जातात आणि त्या ठिकाणी निर्जंतुकीकरण केले जाते.नियमित निर्जंतुकीकरण: मोठ्या क्षेत्रासाठी क्लोरीनयुक्त जंतुनाशक हे मुख्य उपाय आहे आणि 75% अल्कोहोल लहान भागांसाठी वापरले जाऊ शकते.एरोसोलचा सामना करण्याचा एक चांगला मार्ग म्हणजे वायुवीजनासाठी खिडक्या उघडणे आणि अतिनील किरण, गाळणे आणि हवा निर्जंतुकीकरणाद्वारे हवेचे निर्जंतुकीकरण देखील केले जाऊ शकते.

SARS-CoV-2 न्यूक्लिक अॅसिड निर्धाराचे मुख्य दुवे आणि पॅरामीटर्स (रिअल-टाइम फ्लोरोसेंट आरटी-पीसीआर)

जरी प्रयोगशाळा सामान्यत: न्यूक्लिक अॅसिड "डिटेक्शन" वर बारीक लक्ष देतात, खरं तर, न्यूक्लिक अॅसिड "एक्सट्रॅक्शन" हे देखील यशस्वी शोधण्यासाठीचे एक महत्त्वाचे पाऊल आहे, जे व्हायरसचे नमुने गोळा करणे आणि साठवण्याशी जवळून संबंधित आहे.

सध्या, सर्वात मोठ्या प्रमाणावर वापरले जाणारे श्वासोच्छवासाचे नमुने, जसे की नॅसोफॅरिंजियल स्वॅब, दुसरी पद्धत वापरतात, जी न्यूक्लिक अॅसिड निष्कर्षण आणि लिसिस सोल्यूशनवर आधारित एक निष्क्रिय (संरक्षण) द्रावण आहे.एकीकडे, हे विषाणू संरक्षण उपाय विषाणूचे प्रथिने नष्ट करू शकते, त्याची क्रिया गमावू शकते आणि यापुढे संसर्गजन्य राहू शकत नाही आणि वाहतूक आणि शोधण्याच्या टप्प्याची सुरक्षा सुधारू शकते;दुसरीकडे, ते न्यूक्लिक अॅसिड सोडण्यासाठी, न्यूक्लिक अॅसिडचे विघटन करणारे एंझाइम काढून टाकण्यासाठी आणि विषाणूला रोखण्यासाठी व्हायरसला थेट क्रॅक करू शकते.आरएनए निकृष्ट आहे.

न्यूक्लिक अॅसिड एक्स्ट्रक्शन लिसिस सोल्यूशनच्या आधारे तयार केलेले विषाणूचे सॅम्पलिंग सोल्यूशन.मुख्य घटक म्हणजे संतुलित क्षार, इथिलेनेडायमिनटेट्राएसेटिक ऍसिड चेलेटिंग एजंट, ग्वानिडाइन मीठ (ग्वानिडाइन आयसोथियोसायनेट, ग्वानिडाइन हायड्रोक्लोराईड इ.), अॅनिओनिक सर्फॅक्टंट (डोडेकेन) सोडियम सल्फेट), कॅशनिक सर्फॅक्टंट (टेट्राडेसाइल ट्रायमोनोलॉक्‍सलाइन, अ‍ॅमेनिडाइन, अ‍ॅमिथॉलॉक्‍लॉक्‍लॉइड-8), reitol, proteinase K आणि इतर अनेक किंवा अधिक घटक.सध्या, न्यूक्लिक अॅसिड एक्स्ट्रॅक्शन किट्सचे अनेक प्रकार आहेत आणि विविध न्यूक्लिक अॅसिड एक्सट्रॅक्शन आणि शुद्धीकरण अभिकर्मक वापरले जातात.जरी समान न्यूक्लिक अॅसिड काढणे आणि शुद्धीकरण अभिकर्मक वापरले जात असले तरी, प्रत्येक किटची काढण्याची प्रक्रिया भिन्न असते.

सध्या, नॅशनल मेडिकल प्रॉडक्ट्स अॅडमिनिस्ट्रेशनने मंजूर केलेली न्यूक्लिक अॅसिड डिटेक्शन किट उत्पादने SARS-CoV-2 जीनोममधील ORF1ab, E आणि N जनुकांच्या आधारे निवडली जातात.वेगवेगळ्या उत्पादनांची शोध तत्त्वे मुळात सारखीच असतात, परंतु त्यांचे प्राइमर्स आणि प्रोब डिझाइन वेगळे असतात.एकल-लक्ष्य विभाग (ORF1ab), दुहेरी-लक्ष्य विभाग (ORF1ab, N किंवा E), आणि तीन-लक्ष्य विभाग (ORF1ab, N आणि E) आहेत.डिटेक्शन आणि इंटरप्रिटेशन, न्यूक्लिक अॅसिड एक्सट्रॅक्शन आणि रिअल-टाइम फ्लोरोसेंट RT-PCR रिअॅक्शन सिस्टीममधील फरक संबंधित किट सूचनांचा संदर्भ घ्यावा आणि वापरकर्त्यांनी स्पष्टीकरणासाठी किट सूचनांमध्ये नमूद केलेल्या इंटरप्रिटेशन पद्धतीचे काटेकोरपणे पालन करावे अशी शिफारस केली जाते.रिअल-टाइम फ्लोरोसेंट RT-PCR द्वारे वाढवलेले सामान्य क्षेत्र, प्राइमर्स आणि प्रोब अनुक्रम P3 मध्ये दर्शविले आहेत.

zfgd3

P3 जीनोमवरील SARS-CoV-2 amplicon लक्ष्याचे स्थान आणि प्राइमर्स आणि प्रोबचा क्रम

SARS-CoV-2 न्यूक्लिक अॅसिड निर्धाराच्या परिणामांचे स्पष्टीकरण (Real-Time फ्लोरोसेंट RT-PCR)

“सार्स-कोव्ह-२ संसर्गासाठी न्यूमोनिया प्रतिबंध आणि नियंत्रण योजना (दुसरी आवृत्ती)” प्रथमच सिंगल जीन अॅम्प्लीफिकेशनच्या परिणामांचे मूल्यांकन करण्यासाठी निकष स्पष्ट केले:

1. कोणतेही Ct किंवा Ct≥40 ऋण नाही;

2. Ct<37 सकारात्मक आहे;

3. 37-40 चे Ct मूल्य ग्रे-स्केल क्षेत्र आहे.प्रयोग पुन्हा करण्याची शिफारस केली जाते.Ct<40 पुन्हा केल्याने आणि प्रवर्धन वक्र स्पष्ट शिखरे असल्यास, नमुना सकारात्मक मानला जातो, अन्यथा तो नकारात्मक असतो."

मार्गदर्शकाची तिसरी आवृत्ती आणि मार्गदर्शकाची चौथी आवृत्ती वरील निकष चालू ठेवली.तथापि, व्यावसायिक किटमध्ये वापरल्या जाणार्‍या भिन्न लक्ष्यांमुळे, मार्गदर्शकाच्या वरील 3र्‍या आवृत्तीत लक्ष्यांचे संयोजन निश्चित करण्यासाठी निकष दिलेले नाहीत, निर्मात्याने प्रदान केलेल्या सूचना प्रचलित राहतील यावर जोर दिला.मार्गदर्शक तत्त्वांच्या पाचव्या आवृत्तीपासून, दोन लक्ष्ये स्पष्ट केली गेली आहेत, विशेषत: एका लक्ष्यासाठी निर्णयाचे निकष ज्याचा न्याय करणे कठीण आहे.म्हणजेच, जर प्रयोगशाळेला SARS-CoV-2 न्यूक्लिक अॅसिड शोधण्यासाठी केस पॉझिटिव्ह असल्याची पुष्टी करायची असेल, तर खालील 2 पैकी 1 अटी पूर्ण करणे आवश्यक आहे:

(1) एकाच नमुन्यातील SARS-CoV-2 (ORF1ab, N) चे दोन लक्ष्य रिअल-टाइम फ्लोरोसेंट RT-PCR द्वारे सकारात्मक तपासले गेले आहेत.एकच लक्ष्य सकारात्मक असल्यास, पुन्हा नमुने घेणे आणि पुन्हा चाचणी करणे आवश्यक आहे.जर चाचणीचे परिणाम एकल लक्ष्य अद्याप सकारात्मक असल्यास, ते सकारात्मक मानले जाते.

(2) रीअल-टाइम फ्लोरोसेंट RT-PCR च्या दोन नमुन्यांमध्ये एकाच वेळी एकल लक्ष्य पॉझिटिव्ह दिसले किंवा त्याच प्रकारच्या दोन नमुन्यांनी एकच लक्ष्य सकारात्मक चाचणी परिणाम दर्शविला, ज्याचा सकारात्मक म्हणून न्याय केला जाऊ शकतो.तथापि, मार्गदर्शक तत्त्वे यावर देखील जोर देतात की न्यूक्लिक अॅसिड चाचणीचे नकारात्मक परिणाम SARS-CoV-2 संसर्ग वगळू शकत नाहीत.खराब नमुन्याची गुणवत्ता (ओरोफॅरिंक्स आणि इतर भागांमधून श्वसनाचे नमुने), नमुना संकलन खूप लवकर किंवा खूप उशीरा, नमुने संग्रहित, वाहतूक आणि योग्य प्रकारे प्रक्रिया न करणे आणि तंत्रज्ञानामध्येच समस्या (व्हायरस भिन्नता, PCR प्रतिबंध) इत्यादींसह घटक वगळणे आवश्यक आहे.

SARS-CoV-2 शोधण्यातील खोट्या नकारात्मकतेची कारणे

न्यूक्लिक अॅसिड चाचणीमध्ये "खोटे नकारात्मक" ही संकल्पना सध्या संबंधित आहे, बहुतेकदा "खोट्या नकारात्मक" चा संदर्भ देते ज्यामध्ये न्यूक्लिक अॅसिड चाचणीचे परिणाम क्लिनिकल अभिव्यक्तींशी विसंगत असतात, म्हणजेच क्लिनिकल लक्षणे आणि इमेजिंग परिणाम COVID-19 बद्दल अत्यंत संशयास्पद असतात, परंतु न्यूक्लिक अॅसिड चाचण्या नेहमीच "नकारात्मक" असतात.नॅशनल हेल्थ कमिशनच्या क्लिनिकल लॅबोरेटरी सेंटरने “खोटी नकारात्मक” SARS-CoV-2 चाचणी स्पष्ट केली.

(१) संक्रमित व्यक्तीच्या पेशींमध्ये विशिष्ट प्रमाणात विषाणू असतात.विद्यमान डेटा दर्शवितो की शरीराला विषाणूची लागण झाल्यानंतर, विषाणू नाक आणि तोंडातून घशात प्रवेश करतो, नंतर श्वासनलिका आणि ब्रॉन्चामध्ये आणि नंतर अल्व्होलीमध्ये पोहोचतो.संक्रमित व्यक्तीला उष्मायन कालावधी, सौम्य लक्षणे आणि नंतर गंभीर लक्षणांची प्रक्रिया आणि रोगाच्या विविध टप्प्यांचा अनुभव येईल.आणि शरीराच्या वेगवेगळ्या भागांमध्ये उपस्थित असलेल्या विषाणूंचे प्रमाण भिन्न आहे.

पेशींच्या विषाणूजन्य भाराच्या संदर्भात, अल्व्होलर एपिथेलियल पेशी (लोअर रेस्पीरेटरी ट्रॅक्ट) > वायुमार्ग उपकला पेशी (वरच्या श्वसनमार्ग) > फायब्रोब्लास्ट्स, एंडोथेलियल पेशी आणि मॅक्रोफेज इ.;सॅम्पल प्रकारावरून, अल्व्होलर लॅव्हेज फ्लुइड (सर्वात उत्कृष्ट)>खोल खोकला थुंकी>नॅसोफरींजियल स्वॅब>ऑरोफरींजियल स्वॅब>रक्त.याव्यतिरिक्त, विषाणू विष्ठेमध्ये देखील आढळू शकतो.तथापि, ऑपरेशनची सोय आणि रूग्णांची स्वीकृती लक्षात घेता, सामान्यतः वापरल्या जाणार्‍या क्लिनिकल नमुना ऑर्डर म्हणजे ऑरोफॅरिंजियल स्वॅब>नॅसोफॅरिंजियल स्वॅब>ब्रोन्कियल लॅव्हेज फ्लुइड (जटिल ऑपरेशन) आणि खोल थुंकी (सामान्यतः कोरडा खोकला, मिळणे कठीण).

म्हणून, काही रुग्णांच्या ऑरोफरीनक्स किंवा नासोफरीनक्सच्या पेशींमध्ये विषाणूचे प्रमाण लहान किंवा अत्यंत कमी असते.केवळ ऑरोफरीनक्स किंवा नासोफरीनक्सचे नमुने चाचणीसाठी घेतल्यास, व्हायरल न्यूक्लिक अॅसिड आढळणार नाही.

(२) नमुना संकलनादरम्यान विषाणू-युक्त पेशी गोळा केल्या गेल्या नाहीत किंवा विषाणूजन्य न्यूक्लिक अॅसिड प्रभावीपणे संरक्षित केले गेले नाही.

[① अयोग्य संकलन साइट, उदाहरणार्थ, ऑरोफॅरिंजियल स्वॅब गोळा करताना, संग्रहण खोली पुरेशी नसते, गोळा केलेले नासोफरींजियल स्वॅब अनुनासिक पोकळीत खोलवर गोळा केले जात नाहीत, इत्यादी. गोळा केलेल्या बहुतेक पेशी व्हायरस-मुक्त पेशी असू शकतात;

②सॅम्पलिंग स्वॅब चुकीच्या पद्धतीने वापरले जातात.उदाहरणार्थ, पीई फायबर, पॉलिस्टर फायबर आणि पॉलीप्रॉपिलीन फायबर सारख्या कृत्रिम तंतूंची शिफारस स्वॅब हेडच्या सामग्रीसाठी केली जाते.कापूस सारखे नैसर्गिक तंतू प्रत्यक्ष कार्यात वापरले जातात (प्रथिने मजबूत शोषून घेणे आणि धुण्यास सोपे नाही) आणि नायलॉन तंतू (पाणी शोषण कमी, ज्यामुळे सॅम्पलिंगचे प्रमाण अपुरे पडते);

③व्हायरस स्टोरेज ट्यूब्सचा चुकीचा वापर, जसे की न्यूक्लिक अॅसिड (DNA/RNA) शोषण्यास सुलभ असलेल्या पॉलीप्रॉपिलीन किंवा पॉलिथिलीन प्लास्टिक स्टोरेज ट्यूबचा गैरवापर, परिणामी स्टोरेज सोल्यूशनमध्ये न्यूक्लिक अॅसिडचे प्रमाण कमी होते.प्रॅक्टिसमध्ये, व्हायरल न्यूक्लिक अॅसिड साठवण्यासाठी पॉलीथिलीन-प्रॉपिलीन पॉलिमर प्लास्टिक आणि काही विशेष उपचारित पॉलीप्रॉपिलीन प्लास्टिक कंटेनर वापरण्याची शिफारस केली जाते.]

[① अयोग्य संकलन साइट, उदाहरणार्थ, ऑरोफॅरिंजियल स्वॅब गोळा करताना, संग्रहण खोली पुरेशी नसते, गोळा केलेले नासोफरींजियल स्वॅब अनुनासिक पोकळीत खोलवर गोळा केले जात नाहीत, इत्यादी. गोळा केलेल्या बहुतेक पेशी व्हायरस-मुक्त पेशी असू शकतात;

②सॅम्पलिंग स्वॅब चुकीच्या पद्धतीने वापरले जातात.उदाहरणार्थ, पीई फायबर, पॉलिस्टर फायबर आणि पॉलीप्रॉपिलीन फायबर सारख्या कृत्रिम तंतूंची शिफारस स्वॅब हेडच्या सामग्रीसाठी केली जाते.कापूस सारखे नैसर्गिक तंतू प्रत्यक्ष कार्यात वापरले जातात (प्रथिने मजबूत शोषून घेणे आणि धुण्यास सोपे नाही) आणि नायलॉन तंतू (पाणी शोषण कमी, ज्यामुळे सॅम्पलिंगचे प्रमाण अपुरे पडते);

③व्हायरस स्टोरेज ट्यूब्सचा चुकीचा वापर, जसे की न्यूक्लिक अॅसिड (DNA/RNA) शोषण्यास सुलभ असलेल्या पॉलीप्रॉपिलीन किंवा पॉलिथिलीन प्लास्टिक स्टोरेज ट्यूबचा गैरवापर, परिणामी स्टोरेज सोल्यूशनमध्ये न्यूक्लिक अॅसिडचे प्रमाण कमी होते.प्रॅक्टिसमध्ये, व्हायरल न्यूक्लिक अॅसिड साठवण्यासाठी पॉलीथिलीन-प्रॉपिलीन पॉलिमर प्लास्टिक आणि काही विशेष उपचारित पॉलीप्रॉपिलीन प्लास्टिक कंटेनर वापरण्याची शिफारस केली जाते.]

(4) क्लिनिकल प्रयोगशाळा ऑपरेशन प्रमाणित नाही.चाचणी परिणामांची अचूकता आणि विश्वासार्हता सुनिश्चित करण्यासाठी नमुना वाहतूक आणि साठवण परिस्थिती, क्लिनिकल प्रयोगशाळांचे प्रमाणित ऑपरेशन, परिणामांचे स्पष्टीकरण आणि गुणवत्ता नियंत्रण हे महत्त्वाचे घटक आहेत.राष्ट्रीय आरोग्य आयोगाच्या क्लिनिकल प्रयोगशाळा केंद्राने 16-24 मार्च 2020 रोजी केलेल्या बाह्य गुणवत्तेच्या मूल्यमापनाच्या निकालांनुसार, वैध निकाल मिळालेल्या 844 प्रयोगशाळांपैकी 701 (83.1%) पात्र ठरल्या आणि 143 (16.9%) नाहीत.पात्र, एकूण प्रयोगशाळा चाचणी परिस्थिती चांगली आहे, परंतु भिन्न प्रयोगशाळांमध्ये अजूनही कर्मचारी ऑपरेशन क्षमता, एकल-लक्ष्य सकारात्मक नमुना व्याख्या क्षमता आणि गुणवत्ता नियंत्रण यामध्ये फरक आहे.

SARS-CoV-2 न्यूक्लिक अॅसिड डिटेक्शनचे खोटे नकारात्मक कसे कमी करावे?

न्यूक्लिक अॅसिड शोधात खोटे नकारात्मक कमी करणे हे खोट्या नकारात्मक निर्मितीच्या चार पैलूंमधून ऑप्टिमाइझ केले जावे.

(१) संक्रमित व्यक्तीच्या पेशींमध्ये विशिष्ट प्रमाणात विषाणू असतात.संशयित संक्रमित व्यक्तींच्या शरीराच्या वेगवेगळ्या भागांमध्ये विषाणूची एकाग्रता वेगवेगळ्या वेळी भिन्न असेल.घशाची पोकळी नसल्यास, ते ब्रोन्कियल लॅव्हेज द्रव किंवा विष्ठेमध्ये असू शकते.चाचणीसाठी एकाच वेळी किंवा रोगाच्या प्रगतीच्या वेगवेगळ्या टप्प्यांवर अनेक प्रकारचे नमुने गोळा करता येत असल्यास, खोटे नकारात्मक टाळण्यास मदत होईल.

(२) नमुना संकलनादरम्यान विषाणू असलेल्या पेशी गोळा कराव्यात.नमुना संग्राहकांचे प्रशिक्षण अधिक मजबूत करून ही समस्या बर्‍याच प्रमाणात सोडवता येईल.

(3) विश्वसनीय IVD अभिकर्मक.राष्ट्रीय स्तरावर अभिकर्मकांच्या शोध कार्यप्रदर्शन मूल्यमापनावर संशोधन करून, आणि विद्यमान समस्यांवर चर्चा करून, अभिकर्मकांची शोध कार्यक्षमता आणखी सुधारली जाऊ शकते आणि विश्लेषणाची संवेदनशीलता सुधारली जाऊ शकते.

(4) क्लिनिकल प्रयोगशाळांचे प्रमाणित ऑपरेशन.प्रयोगशाळेतील कर्मचार्‍यांचे प्रशिक्षण बळकट करून, प्रयोगशाळेच्या गुणवत्ता व्यवस्थापन प्रणालीमध्ये सतत सुधारणा करून, वाजवी विभागणी सुनिश्चित करून आणि कर्मचार्‍यांची शोध घेण्याची क्षमता सुधारून, अयोग्य प्रयोगशाळेच्या ऑपरेशनमुळे खोटे नकारात्मक कमी करणे शक्य आहे.

बरे झालेल्या आणि डिस्चार्ज झालेल्या रुग्णांमध्ये SARS-CoV-2 न्यूक्लिक अॅसिड चाचणीची पुन्हा चाचणी सकारात्मक येण्याची कारणे

“COVID-19 निदान आणि उपचार योजना (चाचणी सातवी आवृत्ती)” स्पष्टपणे नमूद करते की कोविड-19 रूग्णांना बरे होण्यासाठी आणि हॉस्पिटलमधून डिस्चार्ज मिळण्यासाठीचा एक निकष असा आहे की सलग दोन श्वसनमार्गाच्या नमुन्यांची न्यूक्लिक ऍसिड चाचणी नकारात्मक आहे (किमान 24 तासांच्या अंतरावर), परंतु SA-2 पॉझिटिव्ह SAV-2 चाचण्यांमुळे SAV-2 पॉझिटिव्ह ऍसिड टेस्टमध्ये खूप कमी आहेत. कारणे

(1)SARS-CoV-2 हा नवीन विषाणू आहे.त्याची रोगजनक यंत्रणा, रोगाचे संपूर्ण चित्र आणि रोगाच्या कोर्सची वैशिष्ट्ये समजून घेणे आवश्यक आहे.त्यामुळे, एकीकडे, डिस्चार्ज झालेल्या रुग्णांचे व्यवस्थापन मजबूत करणे आणि 14 दिवसांचे वैद्यकीय निरीक्षण करणे आवश्यक आहे.रोगाची घटना, विकास आणि परिणाम या संपूर्ण प्रक्रियेची समजून घेण्यासाठी पाठपुरावा, आरोग्य निरीक्षण आणि आरोग्य मार्गदर्शन करा.

(२) रुग्णाला पुन्हा विषाणूची लागण होऊ शकते.शिक्षणतज्ज्ञ झोंग नानशान म्हणाले: बरे झालेल्या रुग्णांमध्ये अँटीबॉडीज असल्याने, SARS-CoV-2 ते पुन्हा आक्रमण करतात तेव्हा अँटीबॉडीजद्वारे काढून टाकले जाऊ शकतात.अनेक कारणे आहेत, जे बरे झालेल्या रुग्णाचे कारण असू शकतात किंवा ते विषाणूच्या उत्परिवर्तनाशी संबंधित असू शकतात किंवा प्रयोगशाळेतील चाचणीचे कारण देखील असू शकतात.जर तो स्वतः विषाणू असेल तर, SARS-CoV-2 उत्परिवर्तनामुळे बरे झालेल्या रुग्णाने तयार केलेले प्रतिपिंड उत्परिवर्तित विषाणूविरूद्ध अप्रभावी ठरू शकते.जर रुग्णाला पुन्हा उत्परिवर्तित विषाणूचा संसर्ग झाला असेल तर, न्यूक्लिक अॅसिड चाचणी पुन्हा सकारात्मक असू शकते.

(३) जोपर्यंत प्रयोगशाळा चाचणी पद्धतींचा संबंध आहे, प्रत्येक चाचणी पद्धतीच्या मर्यादा आहेत.SARS-CoV-2 न्यूक्लिक अॅसिड शोधणे जनुकांच्या क्रमाची निवड, अभिकर्मकांची रचना, पद्धतीची संवेदनशीलता आणि इतर कारणांमुळे होते, ज्यामुळे विद्यमान किट्सची स्वतःची कमी ओळख मर्यादा असते.रुग्णावर उपचार केल्यानंतर शरीरातील विषाणू कमी होतात.चाचणी करण्‍याच्‍या नमुन्यातील विषाणूचा भार तपासण्‍याच्‍या खालच्‍या मर्यादेच्‍या खाली असेल, तेव्हा "नकारात्मक" परिणाम दिसून येईल.तथापि, या परिणामाचा अर्थ असा नाही की शरीरातील विषाणू पूर्णपणे गायब झाला आहे.उपचार थांबविल्यानंतर व्हायरस असू शकतो.पुनरुत्थान”, कॉपी करणे सुरू ठेवा.म्हणून, डिस्चार्ज झाल्यानंतर 2 ते 4 आठवड्यांच्या आत आठवड्यातून एकदा पुनरावलोकन करण्याची शिफारस केली जाते.

(४) न्यूक्लिक अॅसिड हे विषाणूचे अनुवांशिक पदार्थ आहे.रुग्णाने अँटीव्हायरल उपचार घेतल्यानंतर व्हायरस मारला जातो, परंतु उर्वरित व्हायरल आरएनएचे तुकडे अजूनही मानवी शरीरात टिकून राहतात आणि शरीरातून पूर्णपणे बाहेर पडत नाहीत.काहीवेळा, काही विशिष्ट परिस्थितीत, ते अधिक ठेवता येते.बराच काळ, आणि यावेळी न्यूक्लिक अॅसिड चाचणी "क्षणिक" सकारात्मक असेल.रुग्णाच्या पुनर्प्राप्ती कालावधीच्या विस्तारासह, शरीरातील अवशिष्ट आरएनए तुकडे हळूहळू संपल्यानंतर, न्यूक्लिक अॅसिड चाचणीचा परिणाम नकारात्मक होऊ शकतो.

(५) SARS-CoV-2 च्या न्यूक्लिक अॅसिड चाचणीचा निकाल केवळ व्हायरल आरएनएची उपस्थिती किंवा अनुपस्थिती सिद्ध करतो आणि व्हायरसची क्रियाशीलता आणि विषाणू संक्रमित आहे की नाही हे सिद्ध करू शकत नाही.न्यूक्लिक अॅसिड चाचणी पॉझिटिव्ह आलेला रुग्ण पुन्हा संसर्गाचा स्रोत बनतो की नाही हे सिद्ध करणे आवश्यक आहे.क्लिनिकल नमुन्यांवर व्हायरस कल्चर करणे आणि तो संसर्गजन्य आहे हे सिद्ध करण्यासाठी “लाइव्ह” व्हायरसची लागवड करणे आवश्यक आहे.

सारांश

सारांश, SARS-CoV-2 nucleic acid चाचणी खोट्या निगेटिव्ह, रीटेस्ट पॉझिटिव्ह आणि इतर अटी ज्या क्लिनिकल अभिव्यक्तींशी विसंगत आहेत त्या पूर्णपणे टाळता येत नाहीत.वास्तविक तपासणी आणि चाचणीमध्ये, चुकलेले निदान आणि चुकीचे निदान टाळण्यासाठी सर्वसमावेशक निदानासाठी क्लिनिकल लक्षणे, इमेजिंग परीक्षा (CT) आणि प्रयोग प्रयोगशाळा चाचणी (न्यूक्लिक अॅसिड चाचणी + विषाणू-विशिष्ट अँटीबॉडी चाचणी) परिणाम एकत्र करण्याची शिफारस केली जाते.चाचणीचे परिणाम स्पष्टपणे क्लिनिकल अभिव्यक्तींशी विसंगत असल्याचे आढळल्यास, SARS-CoV-2 विषाणूचा लवकर संसर्ग, वारंवार होणारा संसर्ग किंवा इतर श्वसन विषाणू संसर्ग, इ.सह एकत्रितपणे वगळण्यासाठी संपूर्ण चाचणी दुव्याचे (नमुना संकलन, अभिसरण आणि प्रक्रिया लिंक्स) सर्वसमावेशक विश्लेषण करण्याची शिफारस केली जाते.जर परिस्थिती परवानगी देत ​​असेल, तर पुन्हा तपासणीसाठी थुंकी किंवा अल्व्होलर लॅव्हेज फ्लुइडसारखे अधिक संवेदनशील नमुने गोळा करण्याची शिफारस केली जाते.

संबंधित उत्पादने:

SARS-CoV-2 न्यूक्लिक अॅसिड डिटेक्शन किट (मल्टीप्लेक्स पीसीआर फ्लोरोसेंट प्रोब मेथड)


पोस्ट वेळ: सप्टेंबर-03-2021