बक्कल स्वॅब/एफटीए कार्ड डीएनए आयसोलेशन किट जीनोमिक डीएनए एक्सट्रॅक्शन किंवा बक्कल स्वॅब्समधून शुद्धीकरण किट
किटचे वर्णन:
बकल स्वॅब/एफटीए कार्डच्या नमुन्यांमधून उच्च-गुणवत्तेचे जीनोमिक डीएनए द्रुतपणे शुद्ध करा.
◮RNase दूषित नाही:किटद्वारे प्रदान केलेल्या DNA-केवळ स्तंभामुळे प्रयोगादरम्यान RNase न जोडता जीनोमिक DNA मधून RNA काढणे शक्य होते, प्रयोगशाळेला एक्सोजेनस RNase द्वारे दूषित होण्यापासून प्रतिबंधित करते.
◮वेगवान गती:फोरजीन प्रोटीजमध्ये सारख्या प्रोटीजपेक्षा जास्त क्रियाशीलता असते आणि ऊतींचे नमुने लवकर पचवतात;ऑपरेशन सोपे आहे, आणि जीनोमिक डीएनए निष्कर्षण ऑपरेशन 20-80 मिनिटांत पूर्ण केले जाऊ शकते.
◮सोयीस्कर:सेंट्रीफ्यूगेशन खोलीच्या तपमानावर केले जाते, आणि 4°C कमी-तापमान सेंट्रीफ्यूगेशन किंवा DNA च्या इथेनॉल पर्जन्याची आवश्यकता नसते.
◮सुरक्षितता:सेंद्रीय अभिकर्मक काढण्याची आवश्यकता नाही.
◮उच्च गुणवत्ता:काढलेल्या जीनोमिक डीएनएमध्ये मोठे तुकडे आहेत, आरएनए नाही, आरएनएस नाही आणि अत्यंत कमी आयन सामग्री आहे, जी विविध प्रयोगांच्या आवश्यकता पूर्ण करू शकते.
◮सूक्ष्म उत्सर्जन प्रणाली:हे जीनोमिक डीएनएची एकाग्रता वाढवू शकते, जे डाउनस्ट्रीम शोध किंवा प्रयोगासाठी सोयीचे आहे.
वर्णन
हे किट बुक्कल स्वॅब्स आणि एफटीए कार्ड (रक्ताचे डाग) पासून उच्च-सांद्रता जीनोमिक डीएनए मिळविण्यासाठी एक कार्यक्षम आणि जलद पद्धत प्रदान करते.आमच्या कंपनीचा वापर करून's अद्वितीय डीएनए-फक्त सिलिका मेम्ब्रेन स्पिन कॉलम आणि फॉर्म्युला, फोरजीन प्रोटीजसह एकत्रित, उच्च-सांद्रता, उच्च-गुणवत्तेचा जीनोमिक डीएनए 80 मिनिटांत काढला जाऊ शकतो.विशेषतः डिझाइन केलेला लहान शुद्धीकरण स्तंभ जीनोमिक डीएनएला बांधतो आणि डीएनए थोड्या प्रमाणात (15μl) प्राप्त केलेल्या जीनोमिक DNA ची एकाग्रता वाढवण्यासाठी उत्सर्जन प्रणाली, जी डाउनस्ट्रीम शोध किंवा प्रयोगासाठी सोयीस्कर आहे.किट एका वेळी एक किंवा अधिक नमुन्यांची प्रक्रिया करू शकते आणि शुद्धीकरण प्रक्रियेसाठी फिनॉल, क्लोरोफॉर्म, आणि वेळ घेणारे आयसोप्रोपॅनॉल किंवा इथेनॉल पर्जन्य यांसारख्या सेंद्रिय पदार्थांची आवश्यकता नसते आणि ऑपरेशन सोपे आणि वेळ वाचवते.
तपशील
50 तयारी
किटचे घटक
| बफर ST1 |
| बफर ST2 |
| रेखीय Acrylamide |
| बफर पीडब्ल्यू |
| बफर WB |
| बफर EB |
| फोरजीन प्रोटीज |
| DNA-केवळ स्तंभ |
| सूचना |
वैशिष्ट्ये आणि फायदे
- RNase दूषित नाही: किटद्वारे प्रदान केलेल्या DNA-केवळ स्तंभामुळे प्रयोगादरम्यान RNase न जोडता जीनोमिक DNA मधून RNA काढणे शक्य होते, प्रयोगशाळेला एक्सोजेनस RNase द्वारे दूषित होण्यापासून टाळता येते.
-फास्ट स्पीड: फोरजीन प्रोटीजमध्ये समान प्रोटीजपेक्षा जास्त क्रियाकलाप आहे, नमुने लवकर पचतात;साधे ऑपरेशन.
-सोयीस्कर: सेंट्रीफ्यूगेशन खोलीच्या तपमानावर केले जाते, आणि त्यासाठी 4°C कमी-तापमान सेंट्रीफ्यूगेशन किंवा DNA च्या इथेनॉल पर्जन्याची आवश्यकता नसते.
-सुरक्षा: सेंद्रिय अभिकर्मक काढण्याची आवश्यकता नाही.
-उच्च दर्जा: काढलेल्या जीनोमिक डीएनएमध्ये मोठे तुकडे असतात, आरएनए नसते, आरनेस नसते आणि अत्यंत कमी आयन सामग्री असते, जी विविध प्रयोगांच्या गरजा पूर्ण करू शकते.
-मायक्रो-इल्युशन सिस्टम: हे जीनोमिक डीएनएचे एकाग्रता वाढवू शकते, जे डाउनस्ट्रीम शोधण्यासाठी किंवा प्रयोगासाठी सोयीचे आहे.
किट अर्ज
हे खालील नमुन्यांमधून जीनोमिक डीएनए शुद्धीकरणासाठी योग्य आहे: बकल स्वॅब्स, एफटीए कार्ड (रक्ताचे डाग).
स्टोरेज आणि शेल्फ लाइफ
-हे किट खोलीच्या तपमानावर (१५-२५ डिग्री सेल्सिअस) कोरड्या परिस्थितीत १२ महिने साठवले जाऊ शकते;जर ते जास्त काळ साठवायचे असेल तर ते 2-8°C वर साठवले जाऊ शकते.
टीप: कमी तापमानात साठवल्यास, द्रावण वर्षाव होण्याची शक्यता असते.वापरण्यापूर्वी, ठराविक कालावधीसाठी खोलीच्या तपमानावर किटमध्ये द्रावण ठेवण्याची खात्री करा.आवश्यक असल्यास, अवक्षेपण विरघळण्यासाठी ते 37° सेल्सिअस वॉटर बाथमध्ये 10 मिनिटे आधीपासून गरम करा आणि वापरण्यापूर्वी ते मिसळा.
-फोरजीन प्रोटीज सोल्यूशनमध्ये एक अनन्य सूत्र आहे, जे खोलीच्या तपमानावर दीर्घकाळ (3 महिने) साठवल्यावर सक्रिय होते;4°C वर संग्रहित केल्यावर त्याची क्रियाशीलता आणि स्थिरता अधिक चांगली होईल, म्हणून ते 4°C वर ठेवण्याची शिफारस केली जाते, लक्षात ठेवा की ते -20°C वर ठेवू नका.
शुद्धीकरण स्तंभ अडकलेला आहे
या किटमध्ये, जीनोमिक डीएनए एक्सट्रॅक्शन ऑपरेशनमध्ये, शुद्धिकरण स्तंभ सेंट्रीफ्यूगेशन स्टेपशिवाय नमुना एंजाइमॅटिक लिसिस मिश्रणावर थेट शोषला जातो आणि अपूर्ण एन्झाइमायझेशन आणि नमुन्याच्या उच्च चिकटपणामुळे शुद्धीकरण स्तंभ अवरोधित केला जाऊ शकतो.
खालील संभाव्य कारणे खालीलप्रमाणे आहेत.
1. ऊतींचे नमुने अपूर्ण एंजाइमॅटिक पचन.
शिफारस: फोरजीन प्रोटीजच्या नमुना प्रक्रियेची वेळ योग्यरित्या वाढवता येऊ शकते किंवा 5 मिनिटांसाठी 12,000 rpm (~13,400 × g) वर सेंट्रीफ्यूगेशननंतर सुपरनॅटंट घेतले जाऊ शकते.
2. ऊतींचे नमुने किंवा मोठ्या ऊतींचा अति वापर.
शिफारस: नमुना मध्ये 1 Buccal स्वॅब पेक्षा जास्त न करणे चांगले आहे;नमुना खूप मोठा असल्यास, त्यानुसार बफर ST1, Foregene Protease, buffer ST2 चा डोस वाढवा.
3. नमुना चिकटपणा खूप जास्त आहे.
शिफारस: जीनोमिक डीएनए काढण्यापूर्वी नमुने 10 मिमी ट्रिस-एचसीएलने योग्यरित्या पातळ केले जाऊ शकतात.
4. रक्त कार्डाचे तुकडे चोखले गेले आहेत.
शिफारस: ब्लड स्पॉट (FTA कार्ड) जीनोमिक एक्सट्रॅक्शनच्या चरण 6 चा क्षणिक सेंट्रीफ्यूगेशन वेळ योग्यरित्या वाढविला जाऊ शकतो.
कमी उत्पन्न किंवा डीएनए नाही
जीनोमिक डीएनए उत्पन्नावर परिणाम करणारे अनेक घटक असतात ज्यात नमुना मूळ, नमुना साठवण परिस्थिती, नमुना तयार करणे, हाताळणी इ.
उत्खननादरम्यान जीनोमिक डीएनए मिळू शकत नाही
संभाव्य कारणे खालीलप्रमाणे आहेत:
1. नमुन्यांची अयोग्य जतन किंवा जास्त काळ साठवणूक केल्याने जीनोमिक डीएनए ऱ्हास होतो.
शिफारस: ओरल स्वॅब्सचे नमुने शक्यतो ताजे केले पाहिजेत आणि जीनोमिक डीएनए एक्सट्रॅक्शन ऑपरेशन्ससाठी संरक्षित स्वॅब वापरणे उचित नाही;रक्ताच्या डागांच्या नमुन्यांनी याची खात्री केली पाहिजे की गुणवत्ता योग्य आहे आणि साठवण वेळ फार मोठा नसावा.
2. फारच कमी टिश्यू वापरामुळे संबंधित जीनोमिक डीएनए काढता येत नाही.
शिफारस: ऑपरेशन मार्गदर्शिकेतील बुक्कल स्वॅब सॅम्पलिंग सूचनांचे अनुसरण करा आणि शक्य तितक्या वेळा पुसून टाका जेणेकरून जीनोमिक डीएनए काढण्यासाठी पुरेशा पेशी तोंडी स्वॅबला जोडल्या जाऊ शकतील;रक्त स्पॉट नमुना काढण्यासाठी, रक्त स्पॉट कटिंग क्षेत्र योग्यरित्या वाढविले जाऊ शकते.
3. फोरेजीन प्रोटीज अयोग्यरित्या संरक्षित आहे, परिणामी त्याची क्रिया किंवा निष्क्रियता कमी होते.
शिफारस: फोरजीन प्रोटीजच्या स्टोरेज परिस्थितीची पुष्टी करा किंवा एन्झाईमॅटिक प्रतिक्रियेसाठी नवीन फोरजीन प्रोटीजसह बदला.
4. किटचे अयोग्य संरक्षण किंवा स्टोरेज वेळ खूप मोठा आहे, परिणामी किटमधील काही घटक निकामी होतात.
शिफारस: संबंधित प्रक्रियांसाठी नवीन बुक्कल स्वॅब डीएनए आयसोलेशन किट खरेदी करा.
5. बफर WB परिपूर्ण इथेनॉल जोडत नाही.
शिफारस: बफर WB परिपूर्ण इथेनॉलची योग्य मात्रा जोडते याची पुष्टी करा.
6. सिलिकॉन फिल्ममध्ये एल्युएंट योग्यरित्या जोडलेले नाही.
शिफारस: सिलिकॉन झिल्लीच्या मध्यभागी 65 °C प्री-वॉर्म्ड एल्युएंट थेंब घाला आणि इल्युशन कार्यक्षमता वाढवण्यासाठी खोलीच्या तापमानाला 5 मिनिटे सोडा.
कमी-उत्पन्न जीनोमिक डीएनए वेगळे
खालील संभाव्य कारणे खालीलप्रमाणे आहेत.
1. नमुन्यांची अयोग्य जतन किंवा जास्त काळ साठवणूक केल्याने जीनोमिक डीएनए ऱ्हास होतो.
शिफारस: ओरल स्वॅब्स प्राधान्याने ताजे नमुने घेतले जातात आणि जतन केलेल्या स्वॅबचा वापर जीनोमिक डीएनए काढण्यासाठी केला जाऊ नये.
2. ऊतींच्या नमुन्याचे प्रमाण खूप कमी असल्यास, काढलेल्या जीनोमिक डीएनए सामग्री कमी असेल.
शिफारस: ऑपरेटिंग गाइडमधील ओरल स्वॅब सॅम्पलिंग सूचनांचे पालन करा, शक्य तितक्या वेळा पुसून टाका जेणेकरुन जीनोमिक डीएनए काढण्यासाठी पुरेशा पेशी ओरल स्वॅबला जोडल्या जाऊ शकतील.
3. फोरेजीन प्रोटीज अयोग्यरित्या संरक्षित आहे, परिणामी त्याची क्रिया किंवा निष्क्रियता कमी होते.
शिफारस: फोरजीन प्रोटीजच्या स्टोरेज परिस्थितीची पुष्टी करा किंवा एन्झाईमॅटिक प्रतिक्रियेसाठी नवीन फोरजीन प्रोटीजसह बदला.
4. Eluent समस्या.
शिफारस: इल्युशनसाठी बफर ईबी वापरा;ddH वापरत असल्यास2O किंवा इतर एल्युएंट, इल्युएटचा pH 7.0-8.5 च्या दरम्यान असल्याची पुष्टी करा.
5. इल्युएट योग्यरित्या ड्रॉपवाइज जोडलेले नाही.
शिफारस: सिलिकॉन झिल्लीच्या मध्यभागी एल्युएंट थेंब घाला आणि इल्युशन कार्यक्षमता वाढवण्यासाठी खोलीच्या तपमानावर 5 मिनिटे सोडा.
6. इल्युशन द्रव खूप कमी जमा होतो.
शिफारस: सूचनांमध्ये आवश्यकतेनुसार जीनोमिक डीएनए इल्युशनसाठी एल्युएंट वापरा, किमान 15 μl पेक्षा कमी नाही.
जीनोमिक डीएनएची कमी शुद्धता अलग केली आहे
कमी जीनोमिक डीएनए शुद्धतेमुळे डाउनस्ट्रीम प्रयोगांचे अयशस्वी किंवा असमाधानकारक परिणाम होऊ शकतात, जसे की: एंजाइम उघडले जाऊ शकत नाहीत, पीसीआरला स्वारस्य असलेल्या जनुकाचा तुकडा मिळू शकत नाही इ.
संभाव्य कारणे खालीलप्रमाणे आहेत:
1. हेटरोप्रोटीन प्रदूषण, आरएनए प्रदूषण.
विश्लेषण: बफर पीडब्ल्यू वापरून शुद्धीकरण स्तंभ धुतला गेला नाही;बफर PW वॉश शुद्धीकरण स्तंभ योग्य केंद्रापसारक गती वापरून धुतला गेला नाही.
शिफारस: इथेनॉल जोडण्यापूर्वी सुपरनॅटंटमध्ये पर्जन्य नाही याची खात्री करा;सूचनांनुसार शुद्धीकरण स्तंभ धुण्याची खात्री करा आणि ही पायरी वगळली जाऊ शकत नाही.
2. अशुद्धता आयन प्रदूषण.
विश्लेषण: बफर WB वॉश शुद्धीकरण स्तंभ वगळण्यात आला किंवा फक्त एकदाच धुतला गेला, परिणामी अवशिष्ट आयनिक दूषित झाले.
शिफारस: शक्य तितक्या अवशिष्ट आयन काढण्यासाठी निर्देशानुसार बफर WB 2 वेळा धुण्याची खात्री करा.
3. आरएनए एंझाइम दूषित होणे.
विश्लेषण: परदेशी RNase बफरमध्ये जोडले गेले;बफर PW वॉश ऑपरेशन चुकीचे होते, परिणामी RNase अवशेष होते, डाउनस्ट्रीम RNA प्रायोगिक ऑपरेशन्सवर परिणाम होतो, जसे की इन विट्रो ट्रान्सक्रिप्शन.
शिफारस: फोरजीन मालिका न्यूक्लिक अॅसिड आयसोलेशन किट RNase च्या अतिरिक्त जोडल्याशिवाय RNA काढू शकतात, त्यामुळे buccal Swab/FTA कार्ड DNA Isolation Kit ला RNase जोडण्याची गरज नाही;बफर पीडब्लू वॉशिंग प्युरिफिकेशन कॉलमच्या सूचनांचे पालन करण्याचे सुनिश्चित करा आणि ही पायरी वगळली जाऊ शकत नाही.
4. इथेनॉल अवशेष.
विश्लेषण: बफर डब्ल्यूबीने शुद्धीकरण स्तंभ धुल्यानंतर रिक्त ट्यूब सेंट्रीफ्यूगेशन केले नाही.
शिफारस: सूचनांनुसार योग्य रिक्त ट्यूब सेंट्रीफ्यूगेशन ऑपरेशन करा.
5. इतर अशुद्धता प्रदूषण.
विश्लेषण: जतन केलेले नमुने किंवा विशेष नमुने प्रीट्रीट केलेले नाहीत.
शिफारस: निर्देशानुसार नमुन्याची पूर्व-प्रक्रिया करा.
